Anti-Typ S APL (PML/RARA) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P29590/P10276

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PML-Funktion und -Lokalisierung

• PML fungiert als Gerüstprotein der PML-Kernkörperchen (PML-NBs), die an Tumorsuppression, Transkriptionsregulation, Apoptose, Seneszenz, DNA-Schadensantwort und Virusabwehr beteiligt sind. Es hemmt den EIF4E-vermittelten mRNA-Kernexport, indem es die EIF4E-Affinität für die 5'-m7G-Kappe von Ziel-mRNAs verringert. Verwandte Referenzen: PMID:11500381 PMID:11575918 PMID:18391071
• Die Isoform PML-4 reguliert Apoptose und Wachstumshemmung entscheidend: Sie aktiviert RB1, hemmt AKT1 über Phosphatasen, moduliert den PI3K-Weg negativ (hemmt MTOR, aktiviert PTEN) und reguliert p53 positiv, indem sie Acetylierung/Phosphorylierung fördert und den MDM2-vermittelten Abbau blockiert.
• PML-4 fungiert als transkriptioneller Repressor von TBX2 während der zellulären Seneszenz, benötigt einen funktionellen RBL2/E2F4-Komplex, reguliert die Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen über WRN-Interaktion, kontrolliert die Telomerase negativ durch Bindung an TERT und moduliert die PER2-Kernlokalisation und den zirkadianen Rhythmus.
• Kernisoformen (PML-1 bis PML-5) kooperieren mit SATB1 bei der lokalen Chromatin-Schleifen-Remodellierung und Genexpressionsregulation am MHC-I-Locus; PML-2 wird für eine effiziente IFN-gamma-induzierte MHC-II-Gentranskription über CIITA-Regulation benötigt.
• PML zeigt breite antivirale Aktivität gegen DNA- und RNA-Viren durch verschiedene isoform-spezifische Mechanismen, einschließlich der Sequestrierung von Virion-Kapsiden, der Hemmung der viralen mRNA/Proteinsynthese und der SUMO-abhängigen Restriktion viraler Polymerasen.
• Fungiert als E3-SUMO-Protein-Ligase, wobei die Isoformen PML-3 und PML-6 die höchste SUMOylierungsaktivität aufweisen; sumoyliert virale und zelluläre Ziele, wie das HHV-5-Immediate-Early-Protein IE1. Verwandte Referenzen: PMID:20972456 PMID:28250117
• Subzellulär lokalisiert PML im Zellkern (Kernplasma, PML-Körperchen, Nukleolus), Zytoplasma, endoplasmatischem Retikulum-Membran und früher Endosomen-Membran; PML-NBs werden bei akuter promyelozytischer Leukämie durch das PML-RARA-Onkoprotein zerstört.
• PML gehört zur TRIM-Proteinfamilie (TRIM19), enthält RING-Finger-, B-Box- und Coiled-Coil-Domänen; alternatives Spleißen führt zu mehreren Isoformen mit unterschiedlichen biologischen Funktionen und subzellulären Verteilungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Die Immunogenmischung aus C-terminalem PML- und N-terminalem RARA-Peptid ist darauf ausgelegt, die PML/RARA-Fusionsstelle zu targetieren; beachten Sie, dass eine Reaktivität mit Wildtyp-PML oder -RARA möglich ist und mit Fusions-positiven versus -negativen Zellmodellen validiert werden sollte.
• Für Western Blot können aufgrund von PML-Isoformen (~47–50 kDa) und RARA-Varianten (~62–97 kDa) mehrere Banden auftreten; das PML-RARA-Fusionsprotein kann sich unterschiedlich bewegen, daher geeignete APL-positive Kontrollen verwenden (z.B. NB4-Zelllinie).
• ELISA kann für das Screening oder die Titration eingesetzt werden; rekombinantes PML-RARA-Protein oder Zelllysate von APL-Patientenproben können als positive Kontrollen dienen.
• Als polyklonaler Antikörper kann er eine robuste Detektion bieten, erfordert jedoch eine sorgfältige Blockierung und Antikörperverdünnungsoptimierung, um unspezifischen Hintergrund zu minimieren.
• Das Produkt wird im Eisbeutel versandt; nach Erhalt bei der empfohlenen Temperatur lagern, um die Langzeitstabilität zu erhalten.

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