Anti-TUBB8-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q3ZCM7

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TUBB8-Funktion und -Lokalisierung

• TUBB8 kodiert die Beta-8-Kette von Tubulin, ein Hauptbestandteil von Mikrotubuli. Mikrotubuli sind zylindrische Polymere, die aus Alpha- und Beta-Tubulin-Heterodimeren bestehen, die sich zu linearen Protofilamenten zusammenlagern.
• TUBB8 spielt eine kritische Rolle bei der Assembly der meiotischen Spindel und ist für eine ordnungsgemäße Chromosomensegregation während der Oozytenreifung unerlässlich. Verwandte Referenzen: PMID:26789871, PMID:34509376
• TUBB8 wird vorwiegend in Oozyten in verschiedenen Entwicklungsstadien exprimiert, was auf seine spezialisierte Funktion in der weiblichen Meiose hinweist.
• Subzellulär lokalisiert sich TUBB8 im Zytoplasma, Zytoskelett und spezifisch an der meiotischen Spindel, was konsistent mit seiner Rolle in der Dynamik der Mikrotubuli ist.
• Wie andere Beta-Tubuline bindet TUBB8 GTP, und seine GTPase-Aktivität ist für die dynamische Instabilität der Mikrotubuli unerlässlich; die Alpha-Untereinheit hydrolysiert GTP, während die Beta-Untereinheit am wachsenden Plus-Ende des Mikrotubulus in der GTP-gebundenen Form vorliegt.
• TUBB8 ist ein Phosphoprotein und enthält Isopeptidbindungen mit potenziellen posttranslationalen Modifikationen, die seine Funktion regulieren.
• Mutationen in TUBB8 sind mit Defekten der Oozytenreifung und weiblicher Unfruchtbarkeit verbunden, was seine klinische Bedeutung in der Reproduktionsmedizin unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 344-444 von humanem TUBB8. Diese Region liegt innerhalb der C-terminalen Domäne, was die Spezifität über Beta-Tubulin-Isoformen hinweg beeinflussen kann; bei Verwendung in nicht-Oozyten-Systemen wird eine Kreuzreaktivitätsprüfung mit anderen Tubulinen empfohlen.
• Für Western Blotting (WB) von humanen Proben wird vorhergesagt, dass TUBB8 bei einer scheinbaren molekularen Masse von ~50 kDa läuft. Verwenden Sie geeignete positive Kontrollen wie Lysate aus humanen Oozyten oder Eierstockgewebe.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) wird erwartet, dass die TUBB8-Färbung an der meiotischen Spindel in Oozyten lokalisiert ist; die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen sollten optimiert werden, um die Mikrotubulistrukturen zu erhalten.
• ELISA-Anwendungen können zur peptidbasierten Quantifizierung verwendet werden; stellen Sie sicher, dass das Beschichtungsantigen mit der Immunogenregion übereinstimmt.
• Da die TUBB8-Expression stark auf Oozyten beschränkt ist, können andere Zelllinien eine niedrige oder keine endogene Expression zeigen; Für funktionelle Studien können Modelle mit erzwungener Expression oder in vitro differenzierte Keimzellen in Betracht gezogen werden.

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