Anti-TTK polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P33981

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: TTK-Funktion und Lokalisierung

• Dualspezifische Proteinkinase TTK (auch bekannt als MPS1) ist eine Serin/Threonin- und Tyrosinkinase, die eine entscheidende Rolle im Kontrollpunkt für den Aufbau der mitotischen Spindel spielt, die Anaphase verzögert bis alle Chromosomen korrekt biorientiert sind und bei der Korrektur fehlerhafter Kinetochor-Mikrotubulus-Bindungen beteiligt ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:18243099, PMID:28441529, PMID:29162720
• TTK phosphoryliert MAD1L1, um den Kontrollpunkt für den Aufbau der mitotischen Spindel zu aktivieren.
  Verwandte Referenzen: PMID:18243099, PMID:29162720
• Es phosphoryliert CDCA8/Borealin und verstärkt die Aktivität der Aurora-B-Kinase (AURKB) am Kinetochor.
  Verwandte Referenzen: PMID:18243099
• Phosphorylierung von SKA3 an Ser-34 durch TTK löst die Dissoziation des SKA-Komplexes von Mikrotubuli aus und destabilisiert die Mikrotubulus-Kinetochor-Bindungen.
  Verwandte Referenzen: PMID:28441529
• TTK phosphoryliert KNL1, KNTC1 und autophosphoryliert sich ebenfalls, was zur Checkpoint-Signalgebung beiträgt.
  Verwandte Referenzen: PMID:28441529
• Es phosphoryliert MCRS1 und verstärkt die Rekrutierung von KIF2A an die Minusenden der Spindelmikrotubuli, was die Chromosomenausrichtung fördert.
  Verwandte Referenzen: PMID:30785839
• Das Protein ist in schnell proliferierenden Zelllinien vorhanden, was mit seinen mitotischen Funktionen übereinstimmt.
• TTK enthält eine ATP-bindende Kinasedomäne, unterliegt Acetylierung und alternatives Spleißen und wird als Referenz-Proteom-Phosphoprotein katalogisiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting zielt das Immunogen auf die C-terminale Region (AS 536-789) des menschlichen TTK ab. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~97 kDa; bestätigen Sie die Bandenwanderung in Ihren spezifischen Lysaten und Bedingungen.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC lokalisiert TTK während der Mitose an den Kinetochoren. Verwenden Sie geeignete Permeabilisierungs- und Fixierungsprotokolle für eine optimale Kinetochorfärbung. Validieren Sie in mitotischen Zellpopulationen (z. B. Nocodazol-behandelte Zellen).
• Für ELISA-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper sowohl als Fang- als auch als Nachweisreagenz, um geeignete Arbeitskonzentrationen zu bestimmen. Fügen Sie Positiv- und Negativkontrollen hinzu.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit menschlichem, murinem und Ratten-TTK, aber die Sequenzhomologie in der Immunogenregion deutet auf eine mögliche Reaktivität mit anderen Spezies hin; eine Validierung in der Zielspezies wird empfohlen.
• Erwägen Sie die Verwendung eines geeigneten Beladungskontroll- und phosphospezifischen Antikörpers für Funktionsstudien der TTK-Kinaseaktivität.

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