Anti-TSC2 (Tuberin) Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA – P49815

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Tuberin

• Tuberin (auch bekannt als TSC2) ist das Proteinprodukt des TSC2-Gens; Aliase sind LAM, TSC4 und PPP1R160.
• Es fungiert als katalytische Komponente des TSC-TBC-Komplexes und wirkt als GTPase-aktivierendes Protein (GAP) für RHEB, einem direkten Aktivator von mTORC1. Zugehörige Referenzen: PMID:12172553 PMID:12820960 PMID:12842888
• Unter Bedingungen von Nährstoffmangel hemmt der TSC-TBC-Komplex mTORC1 und blockiert die Phosphorylierung nachgeschalteter Effektoren wie RPS6KB1 und EIF4EBP1. Zugehörige Referenzen: PMID:12172553 PMID:12271141 PMID:12842888
• Nährstoffsignale inaktivieren den TSC-TBC-Komplex, heben die mTORC1-Unterdrückung auf und fördern so das anabole Zellwachstum. Zugehörige Referenzen: PMID:12172553 PMID:24529379
• Subzellulär lokalisiert Tuberin an der Lysosomenmembran und im Zytosol.
• Es ist breit exprimiert, mit nennenswerten Gehalten in Leber, Gehirn, Herz, Lymphozyten, Fibroblasten, Gallengangsepithel, Bauchspeicheldrüse, Skelettmuskel, Niere, Lunge und Plazenta.
• Tuberin wird durch Phosphorylierung reguliert (es handelt sich um ein Phosphoprotein) und Ubiquitin-Konjugation (Ubl-Konjugation); Mutationen in TSC2 sind mit der tuberösen Sklerose assoziiert, und das Protein wirkt als Tumorsuppressor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1700–1807 von humanem Tuberin (P49815) umfasst; die Antikörpererkennung kann epitopspezifisch sein und keine Kreuzreaktion mit anderen Spezies aufweisen, sofern dies nicht experimentell bestätigt wurde.
• Für den Western Blot hat das volle Länge Tuberin eine vorhergesagte Molekularmasse von ~201 kDa; verwenden Sie ein SDS-PAGE-Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6%) mit verlängerten Transferzeiten und einem geeigneten Marker für hochmolekulare Gewichte.
• Für die Immunpräzipitation validieren Sie die Anreicherung von Tuberin-Komplexen im entsprechenden Zelllysat; fügen Sie geeignete Negativkontrollen hinzu.
• Die ELISA-Leistung kann unter Verwendung des Peptid-Immunogens als Beschichtungsantigen bewertet werden, allerdings sollte die Reaktivität gegen das native Protein im spezifischen Assayformat bestätigt werden.

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