Anti-TRPM8 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q7Z2W7

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TRPM8-Funktion und -Lokalisierung

• TRPM8 ist ein nicht-selektiver Kationenkanal, der für einwertige und zweiwertige Kationen durchlässig ist, mit einer höheren Permeabilität für Ca(2+). Er wird durch kühle Temperaturen (<23-28°C) und chemische Liganden wie Menthol und Icilin aktiviert und dient als primärer Kältesensor in peripheren sensorischen Neuronen. Verwandte Referenzen: PMID:15306801, PMID:15852009, PMID:16174775
• Der Kanal verfügt über eine spannungsabhängige Steuerung; Kühlung oder chemische Agonisten verschieben dessen Aktivierungsschwelle in Richtung physiologischer Membranpotentiale und ermöglichen eine temperaturabhängige Depolarisation. Verwandte Referenzen: PMID:15306801
• Über die Thermorezeption hinaus reguliert TRPM8 die basale Tränensekretion durch die Erkennung der durch Verdunstung verursachten Abkühlung und Änderungen der Osmolarität an der Hornhautoberfläche.
• Bei Prostatakrebs kann TRPM8 zur Zellmigration und -invasion beitragen, und seine Expression ist in Prostatatumoren und anderen Malignomen, einschließlich Dickdarm-, Lungen-, Brust- und Hauttumoren, erhöht. Verwandte Referenzen: PMID:16174775, PMID:25559186
• TRPM8 lokalisiert sich in der Plasmamembran, Membran-Rafts und der Membran des endoplasmatischen Retikulums, was mit Rollen bei der schnellen sensorischen Signalübertragung und der intrazellulären Calciumhandhabung konsistent ist.
• Das Protein ist ein Mitglied der Familie der transienten Rezeptorpotenzial-(TRP)-Kanäle und enthält sechs transmembranäre Domänen, Coiled-Coil-Regionen und eine TRP-Domäne, die für Mitglieder der TRPM-Unterfamilie charakteristisch sind.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, und die Kanalaktivität kann durch alternatives Spleißen moduliert werden, um Isoformen mit unterschiedlichen regulatorischen Eigenschaften zu erzeugen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die zytosolische C-Terminus (aa 980-1104), eine Region, die bei denaturierendem Western Blatt wahrscheinlich zugänglich ist; basierend auf dem theoretischen Molekulargewicht wird eine Bande um 128 kDa erwartet.
• Für Western Blot verwenden Sie Standard-SDS-PAGE und Transfer auf PVDF oder Nitrocellulose; optimieren Sie Blockierungs- und Detektionsbedingungen für dieses mittelgroße bis große Membranprotein.
• ELISA-Anwendungen können direkte oder indirekte Antigenbeschichtung verwenden; titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration für das Assay-Format zu bestimmen.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität in relevanten menschlichen Zelllinien oder Geweben, die bekanntermaßen TRPM8 exprimieren, wie z. B. Prostatakrebslinien (z. B. LNCaP) oder sensorische Neuronenmodelle.

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