Anti-TRIM25 Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q14258

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TRIM25-Funktion und -Lokalisierung

• Encodiert eine E3-Ubiquitin/ISG15-Ligase, die eine zentrale Rolle in der angeborenen Immunität spielt, indem sie die „Lys-63“-verknüpfte Polyubiquitinierung von RIG-I (DDX58) und IFIH1 (MDA5) vermittelt, was zur Produktion von Typ-I-Interferonen nach Virusinfektion führt. Verwandte Referenzen: PMID:17392790, PMID:29357390, PMID:30193849

• Fungiert als ein östrogenresponsives Protein, das die Östrogenwirkung durch Ubiquitinierung und proteasomalen Abbau von ZFHX3 vermittelt und damit hormonelle Signalwege mit dem Proteinumsatz verknüpft. Verwandte Referenzen: PMID:22452784

• Wirkt als ISG15-E3-Ligase, fördert die ISGylierung von 14-3-3 sigma (SFN) und beteiligt sich an breiteren ISGylierungswegen. Verwandte Referenzen: PMID:16352599, PMID:17069755

• Vermittelt die „Lys-63“-verknüpfte Polyubiquitinierung des antiviralen Proteins ZAP/ZC3HAV1, was für eine optimale Bindung an die virale Ziel-mRNA erforderlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:28060952, PMID:28202764

• Fördert den Neustart gestoppter Replikationsgabeln durch Interaktion mit dem KHDC3L-OOEP-Gerüst und Ubiquitinierung der BLM-Helikase, wodurch die Rekrutierung von BLM an DNA-Schadensstellen erleichtert wird.

• Beteiligt an der Unterdrückung der Autophagie durch Ubiquitinierung und Abbau des Autophagierezeptors p62/SQSTM1. Verwandte Referenzen: PMID:40542578

• Ubiquitiniert Substrate, die an der Bildung von Stressgranula, dem Nonsense-vermittelten mRNA-Abbau, der Nukleosidsynthese und der mRNA-Translation/Stabilität beteiligt sind, wie proteomische Studien gezeigt haben. Verwandte Referenzen: PMID:36067236

• Lokalisiert sich subzellulär im Zytoplasma, in Stressgranula und im Zellkern, was seine vielfältigen funktionellen Rollen widerspiegelt. Gehört zur TRIM-Proteinfamilie, die durch einen RING-Finger, B-Box-Zinkfinger und eine Coiled-Coil-Domäne charakterisiert ist.

• Ubiquitär exprimiert, mit bemerkenswerter Expression auf Proteinebene in Brusttumoren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting ist ein Band bei ca. 71 kDa zu erwarten; verwenden Sie geeignete positive Kontrollen wie HeLa-Zelllysate und validieren Sie mit einem Blockierungspeptid oder einer Knockdown-Kontrolle.
• Bei IHC-P sollten Sie die Bedingungen für die Antigen-Retrieval optimieren (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) und mit bekannten TRIM25-positiven Geweben wie Mammakarzinom validieren.
• Für IF/ICC testen Sie Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokolle (z. B. Methanol vs. PFA/Triton), da unterschiedliche Lokalisierungen (Zytoplasma, Stressgranula, Zellkern) angepasste Bedingungen erfordern können.
• Dieser polyklonale Antikörper kreuzreagiert mit Maus und Ratte; überprüfen Sie die speziespezifische Reaktivität in Ihrem experimentellen System durch Vergleich der Sequenzhomologie der Immunogenregion.
• Für IP titrieren Sie den Antikörper sorgfältig, um unspezifische Bindungen zu minimieren; fügen Sie eine Isotypkontrolle und einen Pre-Clearing-Schritt hinzu.
• ELISA-Anwendungen können profitieren, wenn die Beschichtung mit dem Immunogenfragment erfolgt; bestätigen Sie die Linearität und Spezifität unter Verwendung von rekombinantem TRIM25-Protein.

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