Anti-TRIM24 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O15164

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von TRIM24

• TRIM24 (Transcription intermediary factor 1-alpha) ist ein Mitglied der Familie der Tripartite-Motif-Proteine (TRIM) und auch als E3-Ubiquitin-Protein-Ligase TRIM24, RING-Finger-Protein 82 und TIF1-alpha bekannt. Es fungiert als transkriptioneller Koaktivator und E3-Ubiquitin-Ligase.
• TRIM24 interagiert mit dem Chromatin, indem es an Histon H3 bindet, wenn dieses an Lys-4 unmodifiziert (H3K4me0) und an Lys-23 acetyliert (H3K23ac) ist, und vermittelt dadurch die Genregulation. Sein PHD-Finger und seine Bromodomäne erkennen diese Modifikationen.
• Zu Beginn der DNA-Schadensantwort phosphoryliert die ATM-Kinase TRIM24, was zu dessen Ubiquitinierung und Abbau führt. Nach ausreichender DNA-Reparatur aktiviert TP53 die Transkription von TRIM24, und TRIM24 ubiquitiniert seinerseits TP53 zum Abbau, wodurch eine autoregulatorische Rückkopplungsschleife entsteht. Zugehörige Referenz: PMID:24820418
• TRIM24 spielt durch seine Auswirkungen auf die p53/TP53-Spiegel eine Rolle bei der Regulierung von Zellproliferation und Apoptose. Es reguliert die ligandabhängige Transkriptionsaktivierung durch nukleäre Rezeptoren hoch, darunter der Androgenrezeptor (AR), der Glukokortikoidrezeptor (GCR/NR3C1), der Schilddrüsenhormonrezeptor (TR), der Östrogenrezeptor (ESR1) und die Retinsäurerezeptoren (RARs).
• In der angeborenen Immunität vermittelt TRIM24 die spezifische Lys-63-verknüpfte Ubiquitinierung von TRAF3, was zur Aktivierung des Typ-I-Interferon-Signalwegs führt. Zugehörige Referenz: PMID:32324863
• TRIM24 reguliert die durch NLRP3/CASP1/IL-1beta vermittelte Pyroptose und Zellmigration negativ, wahrscheinlich durch die Ubiquitinierung von NLRP3. Zugehörige Referenz: PMID:33724611
• TRIM24 ist im Zellkern, im Zytoplasma und in den Mitochondrien lokalisiert, was seine vielfältigen funktionellen Rollen widerspiegelt.
• Mit TRIM24 assoziierte Schlüsselwörter sind Bromodomäne, PHD-Finger, RING-Typ-Zinkfinger, Coiled-Coil, Transkriptionsregulation, Tumorsuppressor und Proteinubiquitinierung, was seine multifunktionale Natur hervorhebt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 600–820, einschließlich des an der Bindung von Histon H3 beteiligten PHD-Fingers und der Bromodomäne. Diese Region ist wahrscheinlich konserviert. Daher sollte die Möglichkeit einer Kreuzreaktivität mit verwandten Proteinen mit Bromodomäne berücksichtigt und geeignete Kontrollen sollten eingeschlossen werden.
• Bei der Western-Blot-Analyse wandert TRIM24 bei ungefähr 117 kDa. Zur Bestätigung der Bandspezifität sollte eine Negativkontrolle wie ein Lysat aus TRIM24-Knockout-Zellen eingeschlossen oder ein siRNA-Knockdown verwendet werden.
• Dieser Antikörper ist für ELISA geeignet. Aufgrund seiner polyklonalen Natur empfehlen wir, beim Einrichten der Assays eine Kontrolle ohne Primärantikörper und eine Kontrolle mit Präimmunserum einzuschließen.
• Führen Sie Titrationsexperimente durch, um die optimale Verdünnung zu bestimmen. Übliche Ausgangsverdünnungen für polyklonale Antikörper beim Western Blot können zwischen 1:500 und 1:2000 liegen. Validieren Sie den Antikörper stets im relevanten Probensystem.

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