Polyklonaler Anti-TRIM21/SS-A-Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P19474

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TRIM21/SS-A

• TRIM21, auch bekannt als Ro52/SS-A, ist ein 52 kDa großes ribonukleoproteinisches Autoantigen, das als Ribonukleoproteinpartikel vorliegt, bestehend aus einem einzelnen Polypeptid und kleinen RNA-Molekülen. In kernhaltigen Zellen und roten Blutkörperchen kommen mindestens zwei Isoformen vor, wobei gewebespezifische Unterschiede in der Expression bestehen. Zugehörige Referenzen: PMID:8666824
• Fungiert als von E2-Enzymen (UBE2D1, UBE2D2, UBE2E1, UBE2E2) abhängige E3-Ubiquitin-Protein-Ligase und vermittelt die Selbstubiquitinierung sowie die Ubiquitinierung von Substraten wie USP4 und IKBKB; außerdem bildet es einen Komplex mit UBE2D2. Zugehörige Referenzen: PMID:16297862, PMID:16316627, PMID:16472766, PMID:16880511, PMID:19675099
• Ist Bestandteil des SCF(SKP2)-ähnlichen E3-Ubiquitin-Protein-Ligase-Komplexes, der die Ubiquitinierung und den proteasomalen Abbau von CDKN1B/p27 auf phosphorylierungsabhängige Weise fördert und dadurch den Zellzyklus reguliert. Zugehörige Referenzen: PMID:16880511
• Reguliert die Produktion von IFN-beta negativ, indem es den durch Polyubiquitinierung vermittelten Abbau von IRF3 katalysiert, und moduliert die NF-kappa-B-Signalübertragung durch Monoubiquitinierung von IKBKB. Zugehörige Referenzen: PMID:18641315, PMID:19675099
• Dient als Plattform für den Aufbau der Autophagie-Maschinerie, indem es ULK1, Beclin 1 und Mitglieder der ATG8-Familie rekrutiert, und reguliert durch Ubiquitinierung die Initiierung der Autophagie sowie die Stabilität von FIP200. Zugehörige Referenzen: PMID:26347139, PMID:36359729
• Spielt eine Rolle bei der antiviralen angeborenen Immunität, indem es die über „Lys-63“ verknüpfte Ubiquitinierung von NMI zur Förderung der Bildung des NMI-IFI35-Komplexes, die über „Lys-6“ verknüpfte Ubiquitinierung von IFI27 zur Förderung der Pyroptose sowie die über „Lys-27“ verknüpfte Ubiquitinierung von MAVS zur Verstärkung der TBK1-Rekrutierung vermittelt. Zugehörige Referenzen: PMID:26342464, PMID:36426955, PMID:29743353
• Lokalisiert sich im Zytoplasma, im Zellkern, in Autophagosomen, P-Bodies und Stressgranula, was mit seinen vielfältigen funktionellen Rollen übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 86-334, eine Region, die die zentrale Coiled-Coil-Domäne und einen Teil der B30.2/SPRY-Domäne von TRIM21 einschließt. Diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte konserviert und unterstützt die beobachtete Kreuzreaktivität.
• Für Immunoblots (WB) sollten geeignete Proteinextraktions- und Ladekontrollen verwendet werden. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt 54 kDa, jedoch können posttranslationale Modifikationen die Migration verändern.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) sollte die Spezifität des Antikörpers durch den Vergleich des Signals in Wildtyp- gegenüber Knockout-/Knockdown-Modellen validiert werden, sofern verfügbar. Zudem sollte die Antigenrückgewinnung für paraffineingebettete Schnitte optimiert werden.
• Für Immunpräzipitation (IP) und ELISA sollte die Leistung des Antikörpers unter nativen Bedingungen mit einem geeigneten positiven Kontrolllysat oder rekombinanten Protein bestätigt werden.

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