Anti-TPI1 Poliklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P60174

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TPI1

• Triosephosphatisomerase (TPI1) ist ein extrem effizientes Stoffwechselenzym, das die reversible Isomerisierung von Dihydroxyacetonphosphat (DHAP) und D-Glyceraldehyd-3-Phosphat (G3P) katalysiert – ein entscheidender Schritt bei Glykolyse und Glukoneogenese.
• TPI1 bildet außerdem Methylglyoxal, ein reaktives zytotoxisches Nebenprodukt, das Proteine, DNA und Lipide modifizieren kann.
• Das Enzym ist hauptsächlich im Zytoplasma lokalisiert.
• TPI1 unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, darunter Acetylierung, Phosphorylierung, Nitrierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Stabilität regulieren können.
• Mutationen im TPI1-Gen werden mit hereditärer hämolytischer Anämie in Verbindung gebracht, was seine Bedeutung für den Stoffwechsel roter Blutzellen unterstreicht.
• Durch alternatives Spleißen und alternative Promotorverwendung entstehen unterschiedliche Isoformen von TPI1, wobei die funktionelle Bedeutung dieser Varianten noch untersucht wird.
• Das Protein hat ein Molekulargewicht von etwa 27 kDa und ist über Spezies hinweg hochkonserviert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für das Western Blotting verwenden Sie idealerweise ein 10–12 % SDS-PAGE-Gel, um die ~27 kDa große Zielbande effektiv aufzutrennen. Validieren Sie die Antikörperspezifität durch die Einbeziehung von positiven und negativen Zelllysaten oder rekombinanten Proteinkontrollen.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF-P) optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, da TPI1 ein zytoplasmatisches Protein ist; eine Fixierung mit Methanol kann die Detektion verbessern.
• Stellen Sie bei ELISA sicher, dass das Beschichtungsantigen dem Immunogenbereich (Aminosäuren 1-249) entspricht. Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitsverdünnung für Ihr Assayformat zu ermitteln.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde nachgewiesen; überprüfen Sie die Leistung in Ihrem spezifischen Modellsystem, da die Reaktivität zwischen Anwendungen variieren kann.

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