Anti-TOP2A (DNA-Topoisomerase II Alpha) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P11388

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der DNA-Topoisomerase II Alpha

• DNA-Topoisomerase 2-alpha (TOP2A) ist ein nukleäres Enzym, das essentiell für die Lösung topologischer Probleme in der DNA wie Supercoiling, Katenation und Dekatenation ist, was während der DNA-Replikation, Transkription und Chromosomensegregation kritisch ist. Verwandte Referenzen: PMID:17567603, PMID:18790802, PMID:22013166
• TOP2A bildet ein Homodimer und katalysiert den ATP-abhängigen Durchtritt eines doppelsträngigen DNA-Segments durch eine transiente Doppelstrangbruchstelle in einem anderen, wodurch die DNA-Topologie über einen Spaltungs- und Wiederligationsmechanismus verändert wird.
• Gehört zur Familie der Typ-II-DNA-Topoisomerasen und ist unter Eukaryoten hochkonserviert; es weist Homologie zu TOP2B, der Beta-Isoform, auf, zeigt jedoch unterschiedliche Expressionsmuster und funktionelle Rollen.
• Lokalisiert hauptsächlich im Zellkern, einschließlich Nukleoplasma und Nukleolus, und wird auch im Zytoplasma während bestimmter Zellzyklusphasen nachgewiesen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die die Protein-Stabilität, enzymatische Aktivität und Chromosomenbindung modulieren.
• Wird in verschiedenen normalen Geweben wie Tonsille, Milz, Lymphknoten, Thymus und Hoden exprimiert und ist hoch exprimiert in proliferierenden Zellen; seine Expression ist in vielen Krebsarten hochreguliert, einschließlich hochgradiger Lymphome und Plattenepithel-Lungenkarzinome. Verwandte Referenzen: PMID:9155056
• Spielt eine mutmaßliche Rolle bei der Regulation des zirkadianen Rhythmus durch Beeinflussung der BMAL1-Transkriptionsoszillation.
• Wird häufig als Proliferationsmarker und therapeutisches Ziel in der Onkologie verwendet; Inhibitoren wie Etoposid zielen spezifisch auf TOP2A ab, um DNA-Schäden in sich schnell teilenden Zellen zu induzieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Peptid nahe dem C-Terminus von humanem TOP2A; der Antikörper kann sowohl vollständige als auch verkürzte Isoformen erkennen, falls vorhanden.
• Für Western Blot ist in Humanzell- oder Gewebelysaten ein Band von etwa 174 kDa zu erwarten; verwenden Sie ein Gel mit hohem Molekulargewichtsbereich und geeignete Transferbedingungen.
• Erwägen Sie eine Anreicherung nukleärer Fraktionen, um den Nachweis zu verbessern, da TOP2A überwiegend nukleär ist.
• Für ELISA kann das synthetische Peptid als positive Kontrolle immobilisiert werden; der Antikörper kann natives TOP2A in beschichteten Probenvertiefungen einfangen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargen-zu-Charge-Konsistenz für quantitative Anwendungen überprüft werden.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität durch siRNA-Knockdown oder Vergleich mit TOP2A-negativen Zelllinien.

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