Anti-TOLLIP-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9H0E2

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TOLLIP-Funktion und -Lokalisierung

• TOLLIP ist eine Schlüsselkomponente der IL-1- und Toll-like-Rezeptor-Signalwege und fungiert als negativer Regulator durch Hemmung der Zellaktivierung bei mikrobieller Stimulation. Es rekrutiert IRAK1 an den IL-1-Rezeptorkomplex und blockiert die IRAK1-Phosphorylierung und Kinaseaktivität. Verwandte Referenzen: PMID:10854325 PMID:11751856

• Indem es als Ubiquitin-ATG8-Familien-Adapter wirkt, verknüpft TOLLIP den Ubiquitin-Weg mit der Autophagie und vermittelt die selektive autophagische Clearance von Ubiquitin-Konjugaten und zytotoxischen PolyQ-Proteinaggregaten. Verwandte Referenzen: PMID:25042851

• In Verbindung mit TOM1 erleichtert TOLLIP die Rekrutierung von ubiquitin-konjugierten Proteinen zu frühen Endosomen und spielt so eine Rolle beim endosomalen Transport. Verwandte Referenzen: PMID:15047686

• TOLLIP bindet spezifisch an Phosphatidylinositol-3-phosphat (PtdIns(3)P), ein Lipid, das in frühen Endosomen und Autophagosomen angereichert ist, was seine endosomalen und autophagischen Funktionen weiter unterstützt. Verwandte Referenzen: PMID:26320582

• Das Protein ist vorwiegend im Zytoplasma und auf frühen Endosomen lokalisiert, was seinen Rollen in der Signalgebung und im Membrantransport entspricht.

• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, und das Gen unterliegt alternativem Spleißen. Diese Modifikationen können seine vielfältigen Funktionen in Immunität und Autophagie regulieren.

• Das Molekulargewicht beträgt ca. 30kDa (berechnet 30,28 kDa), und es gehört zu einer Familie von Proteinen, die an Entzündungen und angeborener Immunität beteiligt sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 1-274 von menschlichem TOLLIP umfasst und die CUE-Domäne sowie die TOM1-Bindedomäne enthält. Dieses Design kann Reaktivität gegenüber mehreren Isoformen und über Spezies hinweg (Mensch, Maus, Ratte) verleihen.
• Für Western Blots sollten Sie Ganzell- oder Gewebelysate verwenden, die TOLLIP exprimieren, wie z. B. Immunzellen oder Gewebe mit aktiver Autophagie. Die vorhergesagte Bandengröße beträgt ~30kDa.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin) und der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden. Eine positive Färbung wird in punktförmigen zytoplasmatischen und endosomalen Mustern erwartet.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper nach entsprechender Titration als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden.
• Fügen Sie immer geeignete Kontrollen (z. B. Knockout- oder siRNA-Knockdown-Proben) hinzu, um die Spezifität zu bestätigen, insbesondere bei nahen Homologen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, können Chargenunterschiede auftreten; eine Validierung im spezifischen Assay-System wird empfohlen.

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