Anti-TNFSF13B Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9Y275

Kern-Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: TNFSF13B-Funktion und -Lokalisierung

• TNFSF13B (auch bekannt als BAFF, BLyS oder TALL-1) ist ein Zytokin, das zur Superfamilie der Tumornekrosefaktor-(TNF)-Liganden gehört, mit zwei Hauptisoformen, die durch alternatives Spleißen entstehen; Isoform 1 ist die vollständige, bioaktive Form, während Isoform 2 die Sekretion und Funktion von Isoform 1 hemmen kann.
• Als Schlüsselregulator des B-Zell-Homeostase bindet TNFSF13B an die Rezeptoren TNFRSF13B (TACI) und TNFRSF17 (BCMA) und bildet zusammen mit dem Liganden APRIL einen Zwei-Liganden-Zwei-Rezeptor-Weg, der die B- und T-Zell-Funktion stimuliert und die humorale Immunität moduliert.
• Seine Interaktion mit dem BAFF-spezifischen Rezeptor BAFFR (BR3) liefert ein kritisches Überlebenssignal für reife B-Zellen und steuert die peripheren B-Zell-Zahlen sowie die B-Zell-Antwort.
• Neben seiner Rolle als Zytokin kann TNFSF13B als Transkriptionsfaktor für sein eigenes Gen in Komplex mit NF-κB p50 wirken, insbesondere bei autoimmunen und proliferativen B-Zell-Erkrankungen; die Isoform Delta4BAFF ist essentiell für die Freisetzung von löslichem BAFF durch IFN-γ-stimulierte Monozyten und für das B-Zell-Überleben.
• Subzellulär wird TNFSF13B als Typ-II-Transmembranprotein auf der Zellmembran exprimiert, kann aber gespalten und als lösliches Zytokin sezerniert werden.
• Die Gewebeexpression ist reichlich in peripheren Blutzellen, insbesondere in Monozyten und Makrophagen, und findet sich auch in Milz, Lymphknoten, Knochenmark, T-Zellen und dendritischen Zellen, mit niedrigeren Spiegeln in Plazenta, Herz, Lunge und fetalen Geweben; Isoform 2 wird in vielen myeloischen Zelllinien exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und eine Disulfidbrücke; das Protein enthält eine Transmembranhelix und eine konservierte TNF-Homologiedomäne und wird unter Schlüsselwörtern wie Zytokin, Immunität und sekretiertes Protein klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (aa 90–160) von humanem TNFSF13B, einem Bereich, der über Arten hinweg hochkonserviert ist; dieses Design unterstützt die beobachtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte.
• Für Western Blotting beträgt das theoretische Molekulargewicht ca. 31 kDa; reduzierende Bedingungen werden für den Nachweis empfohlen, beachten Sie jedoch, dass Glykosylierung zu einer leichten Aufwärtsverschiebung führen kann.
• Bei der Durchführung der Immunhistochemie (IHC-P) können Methoden der Antigen-Retrieval wie die wärmeinduzierte Epitop-Retrieval (HIER) das Signal verbessern; ein formalinfixierter, in Paraffin eingebetteter Gewebeschnitt von menschlicher Tonsille oder Lymphknoten ist ein geeigneter positiver Kontrollwert.
• Für die indirekte Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollte eine Permeabilisierung in Betracht gezogen werden, um sowohl Membran- als auch intrazelluläre Bestände zu detektieren, da TNFSF13B sezerniert werden kann und im Golgi-Apparat vorhanden sein kann.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden; eine Kombination mit einem monoklonalen Antikörper oder einem anderen polyklonalen Antikörper gegen ein nicht überlappendes Epitop wird für Sandwich-Immunoassays empfohlen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz überprüft werden; fügen Sie immer geeignete positive und negative Kontrollen hinzu, um die Spezifität im gewählten Probensystem zu bestätigen.

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