Anti-TNFAIP3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P21580

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TNFAIP3-Funktion und -Lokalisierung

• Tumor-Nekrose-Faktor-alpha-induziertes Protein 3 (TNFAIP3), auch bekannt als A20, ist ein Ubiquitin-editierendes Enzym, das sowohl Ubiquitin-Ligase- als auch Deubiquitinase-Aktivitäten besitzt.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Beendigung der NF-kappa-B-Aktivierung in Immun- und Entzündungsreaktionen, die durch Zytokine (z. B. TNF, IL-1 beta) und pathogenassoziierte molekulare Muster über Toll-like-Rezeptoren (TLRs) ausgelöst werden.
• TNFAIP3 funktioniert innerhalb eines Ubiquitin-editierenden Komplexes, einschließlich RNF11, ITCH und TAX1BP1, um eine transiente Entzündungssignalgebung zu gewährleisten. Es deubiquitiniert 'Lys-63'-verknüpfte Polyubiquitinketten auf Signalvermittlern wie RIPK1, TRAF6 und MALT1, während es 'Lys-48'-verknüpfte Polyubiquitinketten katalysiert, um Zielproteine für den proteasomalen Abbau zu markieren.
• Es zeigt auch eine nicht-katalytische Hemmung des I-kappa-B-Kinase (IKK)-Komplexes durch eine polyubiquitin-vermittelte Assoziation mit NEMO (IKBKG) und verhindert so die MAP3K7-vermittelte Phosphorylierung.
• Subzellulär befindet sich TNFAIP3 im Zytoplasma, Kern und Lysosom, was seine multifunktionalen Rollen widerspiegelt.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Acetylierung; es enthält Zinkfingerdomänen und eine Deubiquitinase-OTU-Domäne, was es als ein zinkbindendes Thiol-Protease und Transferase klassifiziert.
• Mutationen in TNFAIP3 sind mit Autoimmun- und Entzündungskrankheiten verbunden, und es wirkt als Inhibitor des programmierten Zelltods.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 600-738 von humanen TNFAIP3 ab, eine Region, die wahrscheinlich sowohl Zinkfinger- als auch OTU-Domänen-Motive enthält; daher erkennt der Antikörper möglicherweise sowohl die Volllänge als auch möglicherweise trunkierte Isoformen.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 90 kDa; validieren Sie mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen (z. B. stimulierte vs. unstimulierte Zellen), angesichts der induzierbaren Natur von A20.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) sollten Sie Antigen-Retrieval-Methoden in Betracht ziehen und die Verdünnung optimieren; beachten Sie die zytoplasmatische und nukleäre Lokalisierung von A20.
• Für ELISA ist eine Paarung mit einem Fang-Antikörper möglich; jedoch sollte bei einem polyklonalen Antikörper die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz überwacht werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit Ratte ist angegeben; bestätigen Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen Probensystem durch Pilotexperimente.

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