Anti-TNFα Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P16599

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TNFα-Funktion und Lokalisierung

• TNFα, auch bekannt als Cachectin oder Tumornekrosefaktor-Ligand-Superfamilienmitglied 2, ist ein multifunktionales Zytokin, das hauptsächlich von aktivierten Makrophagen sezerniert wird.
• Es vermittelt seine biologischen Effekte durch Bindung an TNFRSF1A/TNFR1 und TNFRSF1B/TNFBR und löst Signalwege aus, die zu Apoptose oder Zellüberleben führen können.
• Dieses Zytokin ist ein potentes Pyrogen, das direkt Fieber verursacht und durch Stimulation der Interleukin-1-Sekretion wirkt; es ist an der Induktion von Kachexie beteiligt.
• TNFα spielt eine Rolle bei der Insulinresistenz, indem es die insulininduzierte IRS1-Tyrosinphosphorylierung hemmt und den GKAP42-Proteinabbau in Adipozyten fördert.
• Es fördert synergistisch mit IL1B und IL6 die Angiogenese durch Induktion der VEGF-Produktion und stimuliert auch die Osteoklastogenese und vermittelt so die Knochenresorption.
• Die intrazelluläre Domänen (ICD)-Form von TNFα, die durch proteolytische Prozessierung entsteht, kann die IL12-Produktion in dendritischen Zellen induzieren.
• Subzellulär ist TNFα als Transmembranprotein an der Zellmembran lokalisiert, kann aber nach Spaltung als lösliche Form sezerniert werden.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Myristoylierung, Phosphorylierung und Disulfidbindungsbildung, die für seine Struktur und Funktion entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 80-235 von Ratten-TNFα und deckt wahrscheinlich die extrazelluläre Domäne ab; zu beachten ist, dass der polyklonale Antikörper sowohl die Vorläufer- als auch die reife sezernierte Form erkennen kann.
• Für den Western Blot ist eine Bande bei etwa 26kDa zu erwarten; validieren Sie den Antikörper im relevanten Proben-System, um die Spezifität zu bestätigen, da zusätzliche Banden von Prozessierungsintermediaten oder durch Kreuzreaktivität auftreten können.
• Angesichts der vorhergesagten breiten Kreuzreaktivität wird empfohlen, den Nachweis von TNFα aus Human-, Maus- und anderen Spezies mit geeigneten Positivkontrollen zu verifizieren.
• Eine Optimierung der Verdünnungsfaktoren und Inkubationsbedingungen wird für jeden Assay (WB, ELISA) und jede biologische Matrix empfohlen.

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