Anti-TNF-α Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01375

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TNF-α-Funktion und Lokalisierung

• TNF-α (Cachectin, TNFSF2) ist ein proinflammatorisches Zytokin der Tumornekrosefaktor-Superfamilie, das hauptsächlich von Makrophagen sezerniert wird. Es bindet an die Rezeptoren TNFRSF1A/TNFR1 und TNFRSF1B/TNFBR und vermittelt vielfältige zelluläre Reaktionen.
• Wirkt als starkes Pyrogen, das direkt oder über Interleukin-1-Sekretion Fieber verursacht, und ist an der Induktion von Kachexie beteiligt. Unter bestimmten Bedingungen kann es Zellproliferation und -differenzierung stimulieren.
• Beeinträchtigt die Funktion regulatorischer T-Zellen (Tregs) bei rheumatoider Arthritis durch Hochregulierung der Proteinphosphatase 1 (PP1), die FOXP3 an Ser-418 dephosphoryliert und FOXP3 damit inaktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:23396208
• Dient als ein Schlüsselmediator des Zelltods bei der Antikrebs-Wirkung von BCG-stimulierten Neutrophilen in Kombination mit einem DIABLO/SMAC-Mimetikum in Blasenkrebs-Zelllinien. Verwandte Referenzen: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• Spielt eine Rolle bei der Angiogenese durch synergistische Induktion der VEGF-Produktion mit IL1B und IL6. Verwandte Referenzen: PMID:12794819
• Induziert Insulinresistenz in Adipozyten durch Hemmung der insulininduzierten IRS1-Tyrosinphosphorylierung und Glukoseaufnahme, teilweise durch Degradation von GKAP42.
• Subzellulär findet sich TNF-α an der Zellmembran als Transmembranprotein und wird auch in löslicher Form sezerniert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 77-233 von humanem TNF (NP_000585.2) und zielt auf eine Region ab, die sowohl bei der membrangebundenen als auch der löslichen Form vorkommt. Für Western Blotting sollten stimulierten Makrophagenlysate oder rekombinantes Protein als positive Kontrolle in Betracht gezogen werden.
• Für IHC-P kann eine Optimierung der Antigen-Demaskierung erforderlich sein; ein hitzevermitteltes Citratpuffer (pH 6.0) ist ein empfohlener Ausgangspunkt.
• Bei IF-P sollte die Membranpermeabilisierung optimiert werden, um intrazelluläre TNF-α-Pools nachzuweisen.
• ELISA-Anwendungen können von der Kombination dieses polyklonalen Antikörpers mit einem passenden monoklonalen Antikörper für Capture-Detection-Formate profitieren.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-TNF-α ist angegeben, was Flexibilität für translationale Studien bietet, jedoch wird eine speziesspezifische Validierung empfohlen.

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