Anti-TNF-α monoklonaler Antikörper für IHC-P, ELISA - P01375

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TNF-α

• TNF-α, auch bekannt als Cachectin oder TNFSF2, ist ein Mitglied der Tumornekrosefaktor (TNF)-Superfamilie und wird beim Menschen durch das TNF-Gen kodiert.
• Als wichtiges Zytokin, das hauptsächlich von Makrophagen sezerniert wird, bindet es an TNFRSF1A/TNFR1 und TNFRSF1B/TNFBR und vermittelt vielfältige biologische Effekte, darunter Zelltod, Entzündung und Immunregulation.
• Es wirkt als potentes Pyrogen, induziert Fieber und ist an Kachexie beteiligt; unter bestimmten Bedingungen kann es auch die Zellproliferation und Differenzierung stimulieren.
• TNF-α beeinträchtigt die Funktion regulatorischer T-Zellen (Treg) bei rheumatoider Arthritis durch Hochregulation der Proteinphosphatase 1 (PP1), die FOXP3 an Ser-418 dephosphoryliert und Tregs funktionsunfähig macht (PubMed:23396208). Zugehörige Referenzen: PMID:23396208
• Es fördert die Angiogenese durch synergistische Induktion der VEGF-Produktion mit IL1B und IL6 (PubMed:12794819) und treibt die Osteoklastogenese an, wodurch es mit Knochenresorption in Verbindung gebracht wird. Zugehörige Referenzen: PMID:12794819
• Die intrazelluläre Domäne (ICD) von TNF induziert die IL12-Produktion in dendritischen Zellen, was eine nicht-kanonische Signalingfunktion hervorhebt.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zellmembran, Membran und Sekretion; es liegt als transmembranäres Vorläuferprotein vor, das gespalten wird, um das lösliche Zytokin freizusetzen.
• Posttranslationelle Modifikationen wie Glykosylierung, Myristoylierung, Phosphorylierung und Disulfidbrückenbildung sind entscheidend für seine Stabilität und Funktion.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 77-233, die die extrazelluläre Domäne der reifen, sezernierten Form von humanem TNF-α darstellen. Dieses Design gewährleistet die Reaktivität mit dem löslichen Zytokin.
• Für IHC-P sollten Sie Antigen-Retrieval-Protokolle in Betracht ziehen, die für humane Gewebeproben optimiert sind, und die Expression in Positivkontrollen wie entzündeten Lymphknoten oder Synovialgewebe validieren.
• Im ELISA kann dieser Antikörper als Capture- oder Nachweisreagenz verwendet werden; etablieren Sie optimale Bedingungen, indem Sie ihn mit einem passenden Antikörper paaren und rekombinante TNF-α-Standards testen.
• Bestätigen Sie angesichts der Zielregion die Reaktivität mit der nativen trimeren Form von TNF-α in Ihrem Assaysystem, da das Immunogen die Rezeptorbindedomäne abdeckt.

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