Anti-TLR6 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q9Y2C9

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TLR6

• TLR6 (Toll-ähnlicher Rezeptor 6) ist ein Mitglied der Familie der Toll-ähnlichen Rezeptoren (TLR), die eine grundlegende Rolle bei der Erkennung von Pathogenen und der Aktivierung der angeborenen Immunität spielt. Es handelt sich um ein einmal durchlaufendes Typ-I-Membranprotein, das eine extrazelluläre Domäne mit leucinreichen Wiederholungen (LRR), eine Transmembrandomäne und eine zytoplasmatische Toll/Interleukin-1-Rezeptor (TIR)-Domäne enthält.
• TLR6 erkennt spezifisch diacylierte und in geringerem Maße triacylierte Lipopeptide von grampositiven Bakterien und Pilzen. Es bildet an der Zelloberfläche einen Aktivationscluster mit TLR2, CD14 und CD36, der die Signalübertragung aus Membranrafts und anschließende Targeting zum Golgi-Apparat auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:16880211 PMID:20037584
• Die Signalübertragung nachgeschaltet von TLR2:TLR6 wird über MYD88 und TRAF6 vermittelt, was zur Aktivierung von NF-kappa-B, Zytokinsekretion und der Entzündungsreaktion führt. Gemeinsam mit TLR2 erkennt es mikrobielle Komponenten wie mycoplasmal MALP-2, löslichen Tuberkulosefaktor (STF), phenollösliches Modulin (PSM) und B. burgdorferi OspA-L. Verwandte Referenzen: PMID:11441107
• In einem unterschiedlichen Signalweg kann TLR6 mit TLR4 komplexieren, um die sterile Entzündung in Monozyten/Makrophagen als Reaktion auf oxidiertes niedrigdichtes Lipoprotein (oxLDL) oder Amyloid-beta 42 zu fördern, wobei CD36 als initialer Sensor dient. Dies führt zur NF-kappa-B-abhängigen Produktion von CXCL1, CXCL2 und CCL9 (über MYD88) sowie CCL5 (über TICAM1) sowie zur Sekretion von IL1B. Verwandte Referenzen: PMID:11441107 PMID:20037584
• Subzellulär befindet sich TLR6 an der Zellmembran, in zytoplasmatischen Vesikeln, an der Phagosommembran, in Membranrafts und am Golgi-Apparat, was seinen dynamischen Transport nach Aktivierung widerspiegelt.
• Das Protein erfährt posttranslationale Modifikationen einschließlich Glykosylierung und Disulfidbindungsbildung, was mit seiner Präsenz im Sekretionsweg und an der Zelloberfläche übereinstimmt.
• TLR6 wird in Monozyten, CD11c+ unreifen dendritischen Zellen, plasmazytoiden Prä-dendritischen Zellen und dermalen Mikrogefäß-Endothelzellen exprimiert, was seine Rolle bei der Immunüberwachung in Barrieregeweben verdeutlicht.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, die die Ligandspezifität oder Signalausgänge modulieren können.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der C-terminalen Region (Aa 697–796) von humanem TLR6, die wahrscheinlich der zytoplasmatischen Domäne entspricht. Dieses Design begünstigt die Erkennung von gesamten TLR6 unabhängig von Glykosylierung oder Ektodomänenablösung.
• Für die Western Blotting beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht ~92 kDa, aber die reife glykosylierte Form wandert oft bei einem höheren scheinbaren Molekulargewicht. Verwenden Sie reduzierende Bedingungen und validieren Sie die Bandspezifität mit geeigneten Kontrollen.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunozytochemie (IF/ICC) erwarten Sie Färbung der Plasmamembran und intrazellulärer Vesikel. Detergenspermeabilisierung ist für den Nachweis intrazellulärer Pools erforderlich. Co-Färbung mit Organellenmarkern kann aktivierungsinduzierten Transport aufzeigen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit humanem und murinem TLR6; überprüfen Sie die Reaktivität in der gewünschten Spezies und dem Gewebe durch positive und negative Kontrollen.
• ELISA-Anwendungen können unter Verwendung des polyklonalen Antikörpers als Fang- oder Nachweisreagenz entwickelt werden; erwägen Sie die Paarung mit einem monoklonalen Antikörper für verbesserte Spezifität.

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