Anti-TLR4 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - O00206

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TLR4-Funktion und Lokalisierung

• TLR4 ist ein transmembraner Mustererkennungsrezeptor, der Pathogen- und Schadens-assoziierte molekulare Muster (PAMPs und DAMPs) erkennt, um angeborene Immunantworten auszulösen. Verwandte Referenzen: PMID:10835634 PMID:15809303 PMID:16622205
• An der Plasmamembran kooperiert es mit LY96, um die Reaktion auf bakterielles Lipopolysaccharid (LPS) zu vermitteln, und ist auch an LPS-unabhängigen Entzündungsreaktionen auf freie Fettsäuren und Nickelionen beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:27022195 PMID:20711192
• Die Signalübertragung kann über einen MYD88-abhängigen Weg erfolgen, der TIRAP und TRAF6 umfasst und zur NF-kB-Aktivierung und Zytokinsekretion führt, oder über eine CD14-vermittelte Internalisierung, die eine TICAM1-TBK1-IRF3-Achse für die Produktion von Typ-I-Interferonen auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:10835634 PMID:21393102 PMID:27022195 PMID:14517278
• Im Komplex mit TLR6 fördert TLR4 die Entzündung in Monozyten/Makrophagen nach Bindung von Liganden wie oxidiertem LDL oder Amyloid-beta 42, was über sowohl MYD88- als auch TICAM1-Wege zur Chemokinproduktion führt. Verwandte Referenzen: PMID:23880187
• TLR4 lokalisiert an der Zellmembran, in frühen Endosomen und Zellprojektionen wie Rüschen, was seine vielfältigen Signalrollen erleichtert.
• Die Gewebeexpression ist hoch in Plazenta, Milz und peripheren Blutleukozyten; es wird auch in Monozyten, Makrophagen, dendritischen Zellen und bestimmten T-Zellen nachgewiesen, mit aberrantem Expression in Pankreaskrebszellen. Verwandte Referenzen: PMID:9237759 PMID:9435236 PMID:27022195 PMID:36232715
• Zusätzlich initiiert TLR4 die NLRP3-Inflammasom-Aktivierung und ist an einer positiven Rückkopplungsschleife zwischen Autophagie und NF-kB-Signalgebung beteiligt und wird für die ZG16B/PAUF-vermittelte Migration von Pankreaskrebszellen benötigt. Verwandte Referenzen: PMID:32894580

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen extrazellulären Domäne (aa 27–228) von humanem TLR4, was wahrscheinlich Antikörper generiert, die sowohl den Vollrezeptor als auch mögliche lösliche Fragmente erkennen; bestätigen Sie die Zielidentität mit geeigneten Kontrollen.
• Beim Western Blot ist ein Hauptband nahe 96 kDa zu erwarten, aber variable Glykosylierung kann zusätzliche Bänder erzeugen; validieren Sie die Spezifität mit Knockdown- oder Knockout-Proben.
• Für Immunfluoreszenz und Immunzytochemie sind Zellmembran- und endosomale Färbemuster zu erwarten; schließen Sie Permeabilisierungsschritte ein, um intrazelluläre Pools zu detektieren.
• Die berichtete Kreuzreaktivität des Antikörpers mit murinem TLR4 erfordert eine sorgfältige Validierung im relevanten Mausmodellsystem, da Sequenzhomologie die Bindungsaffinität beeinflussen kann.
• Dieser polyklonale Antikörper kann für Immunpräzipitation und ELISA verwendet werden; erwägen Sie eine Optimierung der Bedingungen für jede Anwendung aufgrund der Multiligand-Natur von TLR4.

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