Anti-TKT/Transketolase monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P29401

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TKT/Transketolase-Funktion und -Lokalisation

• Katalysiert den reversiblen Transfer einer Zwei-Kohlenstoff-Ketolgruppe von Sedoheptulose-7-phosphat auf Glycerinaldehyd-3-phosphat, wodurch im Pentosephosphatweg Xylulose-5-phosphat und Ribose-5-phosphat entstehen (PubMed:20667822, PubMed:27259054, PubMed:31534226). Verwandte Referenzen: PMID:20667822, PMID:27259054, PMID:31534226
• Benötigt Thiaminpyrophosphat (TPP) als Kofaktor; bildet während der Katalyse ein kovalentes Intermediat mit TPP.
• Kann auch Fructose-6-phosphat als Ketosedonor nutzen und potenziell die Glykolyse mit dem Pentosephosphatweg verbinden.
• Liegt als Homodimer vor; die dreidimensionale Struktur wurde aufgeklärt, wobei jede Untereinheit Metallionen wie Ca²⁺ und Mg²⁺ bindet.
• Unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitin-ähnlicher Konjugation (Isopeptidbindung).
• Mutationen in TKT verursachen ein Syndrom mit Kleinwuchs, Entwicklungsverzögerung und angeborenen Herzfehlern, bekannt als SDDHD (Short Stature, Developmental Delay, and Congenital Heart Defects).
• Alternativ gespleißte Transkriptvarianten erzeugen mehrere Isoformen mit potenziell unterschiedlichen regulatorischen Eigenschaften.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 281–380 von humanem TKT, einer Region, die ein oberflächenzugängliches Epitop im nativen Homodimer darstellen könnte. Für Immunpräzipitation oder Durchflusszytometrie sollten milde Lysebedingungen in Betracht gezogen werden, um die native Konformation zu erhalten.
• Für Western Blot ist die vorhergesagte Bande bei ~68 kDa; verwenden Sie geeignete Gelprozentsätze (z. B. 8–10% SDS-PAGE) und validieren Sie die Antikörperverdünnungen mit einem relevanten positiven Kontrolllysat (z. B. human, Maus oder Ratte).
• Bei IHC-P- und IF/ICC-Anwendungen werden Standard-Antigen-Retrieval- und Blockierschritte empfohlen; die Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattengewebe sollte in Ihrem spezifischen experimentellen Kontext validiert werden.
• Bewerten Sie die optimalen Arbeitskonzentrationen individuell für ELISA und andere Anwendungen; die Chargen-zu-Charge-Konsistenz ist bei rekombinanten monoklonalen Antikörpern typischerweise hoch.

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