Anti-TIMP2 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16035

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TIMP2-Funktion und Lokalisierung

• TIMP2 (Metalloproteinase-Inhibitor 2) ist ein sekretiertes Protein, das zur Familie der Gewebeinhibitoren von Metalloproteinasen (TIMP) gehört und durch seine Fähigkeit charakterisiert ist, Matrix-Metalloproteinasen (MMPs) zu hemmen.
• Die Hauptfunktion von TIMP2 besteht darin, nicht-kovalente Komplexe mit verschiedenen MMPs zu bilden, darunter MMP-1, MMP-2, MMP-3, MMP-7, MMP-8, MMP-9, MMP-10, MMP-13, MMP-14, MMP-15, MMP-16 und MMP-19, wodurch diese irreversibel inaktiviert werden.
• Die Hemmung erfolgt durch die Bindung von TIMP2 an den katalytischen Zink-Cofaktor im aktiven Zentrum der MMPs, wodurch der Substratzugang und die enzymatische Aktivität blockiert werden.
• TIMP2 wird als Vorläufer mit einem Signalpeptid synthetisiert und in die extrazelluläre Matrix sekretiert, wo es eine entscheidende Rolle bei der Regulation des Abbaus der extrazellulären Matrix und des Gewebeumbaus spielt.
• Das Protein enthält mehrere Disulfidbrücken, die seine dreidimensionale Struktur stabilisieren, was für seine inhibitorische Funktion wesentlich ist.
• TIMP2 wird unter Schlüsselwörtern wie Metalloprotease-Inhibitor, Protease-Inhibitor und Metallbindung klassifiziert, was seine Rolle bei der Kontrolle der Proteolyse und zinkabhängigen Enzyme hervorhebt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer Sequenz innerhalb der Aminosäuren 50-150 von humanem TIMP2, einer Region, die wahrscheinlich funktionelle Domänen enthält; überprüfen Sie die Spezifität mit Knockout- oder Knockdown-Kontrollen in relevanten Zelllinien.
• Für Western Blot (WB) sollten aufgrund der Anwesenheit von Disulfidbrücken reduzierende Bedingungen und Erhitzen in Betracht gezogen werden, um eine ordnungsgemäße Denaturierung und Detektion bei dem vorhergesagten Gewicht von ~24 kDa sicherzustellen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) wird TIMP2 sekretiert; daher ist eine Permeabilisierung möglicherweise nicht erforderlich, aber die Fixierungsbedingungen sollten optimiert werden, um extrazelluläre Epitope zu erhalten.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-TIMP2; validieren Sie ihn für jede Spezies und Anwendung individuell.
• Für ELISA: Kombinieren Sie ihn mit einem geeigneten Detektionsantikörper und bewerten Sie Standardkurven mit rekombinantem TIMP2-Protein, um die Empfindlichkeit und den dynamischen Bereich zu bestätigen.

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