Anti-TIMP1-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P01033

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TIMP1

• TIMP1 (Metalloproteinase-Inhibitor 1) ist ein sezerniertes Protein, das als wichtiger Inhibitor von Matrixmetalloproteinasen (MMPs), einschließlich Kollagenasen, wirkt. Es bildet Komplexe im Verhältnis 1:1 und inaktiviert diese irreversibel durch Bindung an ihren katalytischen Zink-Kofaktor.
• Es wirkt auf ein breites Spektrum von MMPs, darunter MMP1, MMP2, MMP3, MMP7, MMP8, MMP9, MMP10, MMP11, MMP12, MMP13 und MMP16, hemmt jedoch MMP14 nicht.
• Über die MMP-Hemmung hinaus wirkt TIMP1 als Wachstumsfaktor, der die Zelldifferenzierung, Migration und Apoptose reguliert und über die Rezeptoren CD63 und ITGB1 zelluläre Signalkaskaden aktiviert.
• TIMP1 vermittelt in vitro die Erythropoese und stimuliert artspezifisch das Wachstum und die Differenzierung humaner und muriner erythroider Vorläuferzellen.
• Das Protein ist auch als erythroide Verstärkungsaktivität (Erythroid-potentiating activity, EPA) und als Fibroblasten-Kollagenase-Inhibitor bekannt, was seine beiden Funktionen widerspiegelt.
• TIMP1 wird in der Synovialflüssigkeit bei rheumatoider Arthritis nachgewiesen, was auf eine Beteiligung an entzündlichen Gelenkerkrankungen hinweist.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung, Phosphorylierung und das Vorhandensein von Disulfidbrücken, die für seine Stabilität und Funktion entscheidend sind.
• Strukturell enthält es ein Signalpeptid und ein Zinkbindemotiv und gehört zur Familie der Gewebe-Inhibitoren von Metalloproteinasen (TIMP).

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Bei der Western-Blot-Analyse sollte aufgrund des Molekulargewichts des Proteins von etwa 23 kDa und des Vorhandenseins von Disulfidbrücken eine reduzierende und denaturierende Behandlung in Betracht gezogen werden, um eine korrekte Migration zu gewährleisten.
• Bei Immunfluoreszenzanwendungen sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte für sezernierte Proteine optimiert werden. Eine Ko-Färbung mit Organellmarkern kann zur Bestätigung der Lokalisation beitragen.
• Da der Antikörper gegen ein rekombinantes Fragment erzeugt wurde, ist zu erwarten, dass er sowohl natives als auch denaturiertes TIMP1 erkennt. Eine Validierung in der relevanten Spezies und im entsprechenden Probentyp wird jedoch empfohlen.
• Bei der Verwendung im ELISA sollte der Antikörper mit einem geeigneten Detektionsantikörper kombiniert und die Testbedingungen validiert werden, da polyklonale Antikörper Chargen-zu-Chargen-Schwankungen aufweisen können.

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