Anti-TIM-3/HAVCR2-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q8TDQ0

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TIM-3/HAVCR2

• TIM-3 (zellulärer Rezeptor 2 des Hepatitis-A-Virus) ist ein Transmembranprotein vom Typ I, das zur Immunglobulin-Superfamilie und zur TIM-Familie gehört. Es ist auch als T-Zell-Immunglobulin- und Muzindomänen-enthaltendes Protein 3 (TIMD-3) und CD366 bekannt.
• Es fungiert hauptsächlich als inhibitorischer Immun-Checkpoint-Rezeptor auf T-Zellen, dämpft die TCR-Signalübertragung und fördert die T-Zell-Erschöpfung; es hemmt Th1-vermittelte Autoimmun- und Alloimmunreaktionen und trägt zur immunologischen Toleranz bei (PMID:14556005).
  Zugehörige Referenzen: PMID:14556005
• Es wirkt als Rezeptor für Galectin-9 (LGALS9), das die Apoptose von T-Zellen induziert und Effektorfunktionen unterdrückt, wobei diese Interaktion umstritten ist (PMID:16286920, PMID:24337741, PMID:23555261).
  Zugehörige Referenzen: PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• Es bindet außerdem calciumabhängig Phosphatidylserin (PtSer), vermittelt die Phagozytose apoptotischer Zellen und reguliert die angeborene Immunität, insbesondere in dendritischen Zellen und Makrophagen (PMID:24825777).
  Zugehörige Referenzen: PMID:24825777
• Es wird in verschiedenen Subpopulationen von Immunzellen exprimiert: Th1-Lymphozyten, regulatorischen T-Zellen (Tregs), dendritischen Zellen, natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) und Epithelgeweben; die Expression ist bei chronischen Virusinfektionen wie HCV und HIV hochreguliert und trägt zur Immunerschöpfung bei.
• Es spielt eine duale Rolle in der angeborenen Immunität: Auf NK-Zellen kann es die IFN-gamma-Produktion als Reaktion auf LGALS9 verstärken (PMID:22323453) oder die NK-zellvermittelte Zytotoxizität unterdrücken (PMID:22383801).
  Zugehörige Referenzen: PMID:22323453 PMID:22383801
• Es unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Glykosylierung, Palmitoylierung und Phosphorylierung; es weist Disulfidbrücken und eine Ig-ähnliche V-Typ-Domäne auf, die für die Ligandenbindung essenziell ist.
• Subzelluläre Lokalisation: überwiegend an der Zellmembran und an Zellkontakten, wo es an der Bildung und Signalübertragung der Immunsynapse beteiligt ist.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Der Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das der extrazellulären Domäne (AS 22–202) entspricht und sich zum Nachweis von nativem und denaturiertem TIM-3 in WB, IHC-P und ELISA eignet.
• Für die WB-Analyse sollten reduzierende Bedingungen und Gesamtzelllysate aus Jurkat-Zellen oder aktivierten primären T-Zellen in Betracht gezogen werden, um die erwartete Bande bei etwa 33 kDa zu bestätigen, wobei die Glykosylierung ein höheres scheinbares Molekulargewicht verursachen kann.
• Für IHC-P können Methoden zur Antigenrückgewinnung erforderlich sein, beispielsweise Citratpuffer mit pH 6,0. Das Färbemuster sollte in menschlichem Tonsillen- oder Lymphknotengewebe mit geeigneten Negativkontrollen validiert werden.
• Für ELISA kann der Antikörper sowohl als Fang- als auch als Nachweisreagenz untersucht werden; führen Sie Schachbrett-Titrationen mit beschichtetem rekombinantem TIM-3 und bekannten Positivproben durch.
• Angesichts der berichteten Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte sollte die Sequenzhomologie der Immunogenregion zwischen den Spezies überprüft und der Antikörper in geeigneten Nagetiermodellen validiert werden, beispielsweise in Mausmilzlysaten oder Ratgewebeschnitten.

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