Anti-TIGIT Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, ELISA - Q495A1

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von TIGIT

• TIGIT (T-Zell-Immunorezeptor mit Ig- und ITIM-Domänen) ist ein inhibitorischer Rezeptor der Immunglobulin-Superfamilie, auch bekannt als VSIG9, VSTM3 oder WUCAM. Es besitzt eine extrazelluläre V-Ig-ähnliche Domäne, eine Transmembranhelix und ein zytoplasmatisches ITIM-Motiv.
• Funktioniert als zentraler negativer Regulator von T-Zell- und NK-Zell-Antworten. Es hemmt die T-Zell-Aktivierung, indem es die Generierung von reifen immunregulatorischen dendritischen Zellen fördert. Verwandte Referenzen: PMID:19011627
• Nach der Bindung an seine Liganden PVR/CD155 oder NECTIN2/CD112 auf antigenpräsentierenden Zellen wird TIGIT durch die Src-Kinasen FYN oder LCK phosphoryliert. Dies führt zur Rekrutierung von GRB2 und SHIP1/INPP5D und anschließender Hemmung der PI3K- und MAPK-Signalwege. Verwandte Referenzen: PMID:23154388
• Bei einem unterschiedlichen inhibitorischen Mechanismus assoziiert TIGIT mit Beta-Arrestin-2, um SHIP1 zu rekrutieren. Dies unterdrückt die Autoubiquitinierung von TRAF6 und hemmt den NF-kappa-B-Signalweg. Verwandte Referenzen: PMID:24817116
• Dient außerdem als Rezeptor für NECTIN4, über den es die Zytotoxizität von NK-Zellen hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:32503945
• Als einzepassiges Typ-I-Membranprotein ist es in der Zellmembran lokalisiert.
• Wird in niedrigen Konzentrationen auf peripheren Gedächtnis- und regulatorischen CD4+-T-Zellen sowie NK-Zellen exprimiert und nach Aktivierung dieser Zellen hochreguliert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung des ITIM-Motivs nach Ligandenbindung; wird den Schlagwörtern Phosphoprotein, Glykoprotein, Disulfidbindung und Alternatives Spleißen zugeordnet.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 22–141) umfasst die gesamte extrazelluläre Ig-ähnliche Domäne, was die Detektion sowohl von monomerem als auch von ligandengebundenem TIGIT ermöglicht.
• Für Western Blotting beträgt die vorhergesagte Proteinmasse ca. 26 kDa. Verwenden Sie reduzierte SDS-PAGE-Bedingungen und geeignete Positivkontrollen wie Lysate aktivierter T-Zellen oder NK-Zellen.
• Für ELISA-Anwendungen ist es vorteilhaft, das rekombinante Immunogen oder das vollständige TIGIT-Protein zu beschichten. Validieren Sie die Spezifität bei Verfügbarkeit mit TIGIT-Knockdown- oder Knockout-Zelllinien.
• Da der Antikörper kreuzreaktiv mit Maus-TIGIT reagiert, kann er für Immun-Checkpoint-Studien in Mausmodellen verwendet werden. Titrieren und validieren Sie ihn vor quantitativen Experimenten im entsprechenden Proben System.

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