Anti-THOC4/ALYREF Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q86V81

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: THOC4/ALYREF Funktion und Lokalisierung

• THOC4/ALYREF, auch bekannt als THO-Komplex-Untereinheit 4, ist eine Kernkomponente des TREX-Komplexes (Transkription/Export) und fungiert als mRNA-Exportadapter, der die Transkription mit der mRNA-Verarbeitung und dem nuklearen Export gespleißter mRNAs koppelt. Verwandte Referenzen: PMID:15833825 PMID:15998806 PMID:17190602

• Bindet spezifisch an gespleißte mRNA und wird in einer Cap- und Spleiß-abhängigen Weise in der Nähe des 5'-Endes rekrutiert, wobei es mit dem Cap-bindenden Protein NCBP1 interagiert, um den TREX-Komplex zusammenzusetzen. Verwandte Referenzen: PMID:15833825 PMID:15998806 PMID:17190602

• Vermittelt den nuklearen Export von intronlosen mRNAs durch Rekrutierung über ATP-gebundenes DDX39B; dieser Weg ist für den Export viraler intronloser mRNAs, wie z. B. des Kaposi-Sarkom-assoziierten Herpesvirus (KSHV), unerlässlich. Verwandte Referenzen: PMID:17984224

• Fungiert als verbindender Adapter zwischen dem Exon-Junction-Komplex (EJC) und dem TREX-Kern und erleichtert die Übergabe der mRNA an den Exportrezeptor NXF1-NXT1 für die Translokation durch den Kernporenkomplex. Verwandte Referenzen: PMID:37020021 PMID:11675789 PMID:11707413 PMID:11979277

• Arbeitet mit THOC5 zusammen, um die RNA-Bindungsaktivität von NXF1 zu verstärken, und ist für dessen Lokalisierung am nuklearen Rand erforderlich, wodurch der nukleare Export spezifischer mRNAs wie HSP70 vorangetrieben wird. Verwandte Referenzen: PMID:19165146

• Erkennt 5-Methylcytosin (m5C)-modifizierte mRNAs und vermittelt deren nukleo-zytoplasmatischen Shuttle, wodurch eine Ebene der Epitranskriptom-Regulation zum mRNA-Export hinzugefügt wird. Verwandte Referenzen: PMID:28418038

• Fungiert als molekularer Chaperon, der die Dimerisierung von bZIP-Transkriptionsfaktoren (Basic Leucine Zipper) fördert und so die transkriptionelle Aktivierung verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:10488337

• Lokalisiert subzellulär im Zellkern, in Kernspeckles und im Zytoplasma; posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Citrullinierung und Phosphorylierung. Wird in einer Vielzahl von Krebsarten exprimiert und ist auch an der Transkriptionselongation und Genomstabilität beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:12438613

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das der N-terminalen Region (aa 1–100) von humanem THOC4/ALYREF entspricht. Überprüfen Sie die Sequenzkonservierung bei Maus und Ratte (UniProt-Accessions: Q8VE80, Q6AYK3), um die erwartete Kreuzreaktivität basierend auf der Aminosäureidentität sicherzustellen.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande bei ~27 kDa zu erwarten. Fügen Sie Lysate von HeLa-, HEK293- oder anderen THOC4-exprimierenden Zellen als positive Kontrollen hinzu; siRNA-Knockdown- oder Knockout-Proben können als negative Kontrollen dienen.
• Optimieren Sie bei der Immunhistochemie (IHC-P) und der Immunfluoreszenz (IF/ICC) die Antigen-Retrieval (z. B. wärmeinduzierte Epitop-Retrieval in Citratpuffer) und die Permeabilisierung. THOC4/ALYREF zeigt nukleäre und nucleoplasmatische Färbung; Co-Färbung mit nukleären Markern bestätigt die Lokalisierung.
• Für ELISA-Anwendungen beschichten Sie die Platte mit dem Immunisierungspeptid oder rekombinantem THOC4/ALYREF-Protein. Titrieren Sie den Antikörper von 1:500 bis 1:32.000 und detektieren Sie mit einem geeigneten Sekundärantikörper.
• Validieren Sie die Leistung immer im relevanten Probensystem und in der Anwendung; empfohlene Literaturkontrollen finden Sie in den zitierten Veröffentlichungen.

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