Anti-TGM3 Poliklonale Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q08188

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TGM3/Transglutaminase 3

• Transglutaminase 3 (TGM3), auch bezeichnet als TGase E, TG(E), TGE oder UHS2, ist ein kalziumabhängiges Enzym der Transglutaminase-Familie.
• TGM3 katalysiert die Bildung von Isopeptid-Quervernetzungen zwischen Glutamin- und Lysinresten in Proteinen sowie die Konjugation von Polyaminen an Proteine, wodurch Proteinstruktur und -stabilität modifiziert werden.
• Es ist essenziell für die Bildung der verhornten Zellhülle (Cornified Envelope, CE) in terminal differenzierten Keratinozyten, wo es kleine prolinreiche Proteine (SPRR1 und SPRR2) und Loricrin (LOR) zu Oligomeren quervernetzt, die anschließend von TGM1 auf das wachsende CE-Gerüst aufgebaut werden.
• In Haarfollikeln trägt TGM3 zur Verhärtung der inneren Wurzelscheide durch Quervernetzung von Strukturproteinen bei – ein Prozess, der für die Integrität und Festigkeit des Haarschaftes entscheidend ist.
• Das Protein lokalisiert hauptsächlich im Zytoplasma und unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung; es wird als Zymogen produziert, das für die Aktivierung proteolytischer Spaltung bedarf.
• UniProt-Annotationen geben zudem an, dass TGM3 eine metallbindende Acyltransferase mit bekannter 3D-Struktur ist, und es wurde in proteomischen Analysen identifiziert (Schlüsselwörter: Acetylierung, Phosphoprotein, Zymogen, 3D-Struktur).

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Der Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein immunisiert, das den N-terminalen Bereich (Aminosäuren 1-180) von humanem TGM3 umfasst. Er erkennt voraussichtlich vollständiges TGM3 und potenziell Spleißvarianten, die dieses Segment enthalten.
• Für die Western Blotting (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~77 kDa; die Verwendung eines 4-20 % Gradientengels oder einer 8 % SDS-PAGE wird empfohlen. Fügen Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. Keratinozyten-Lysate) hinzu und validieren Sie die Antikörperspezifität in relevanten Proben.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) beachten Sie, dass TGM3 zytoplasmatisch lokalisiert ist: optimieren Sie die Bedingungen für Zellfixierung und Permeabilisierung, um eine ausreichende Antikörperpenetration bei Erhalt der Antigenität zu gewährleisten.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Detektions- oder Fangreagenz eingesetzt werden, nachdem seine Leistung mit gereinigtem Antigen oder biologischen Proben bestätigt wurde; validieren Sie ihn in der relevanten Probenmatrix.
• Laut Lieferantenangaben reagiert der Antikörper sowohl mit humanem als auch mit murinem TGM3; validieren Sie die Kreuzreaktivität in Ihrem gewünschten Modellsystem vor quantitativen Assays.
• Titrieren Sie den Antikörper immer für jede Anwendung und verwenden Sie geeignete Kontrollen, um unspezifische Bindung auszuschließen.

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