Anti-TGF-beta-Rezeptor II (TGFBR2) Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P37173

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des TGF-beta-Rezeptors Typ-2

• Rezeptoridentität und Struktur: Der TGF-beta-Rezeptor Typ-2 (TGFBR2) ist eine einpassige Transmembran-Serin/Threonin-Kinase vom Typ I, die als hochaffiner Rezeptor für die TGF-beta-Zytokine TGFB1, TGFB2 und TGFB3 fungiert. Er wird vom TGFBR2-Gen auf dem menschlichen Chromosom 3 kodiert, alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, von denen einige mit hereditärem nicht-polypösem kolorektalen Krebs, Aortenaneurysma und Kraniosynostose verbunden sind.
• Kanonische SMAD-abhängige Signalgebung: Nach der Ligandenbindung paart sich TGFBR2 mit zwei Typ-I-Rezeptoren (TGFBR1) zu einem heterotetrameren Komplex. Die konstitutiv aktive Kinasedomäne von TGFBR2 phosphoryliert TGFBR1, das wiederum SMAD2 und SMAD3 aktiviert. Die phosphorylierten SMADs bilden einen Komplex mit SMAD4 und wandern in den Zellkern, um die Transkription von TGF-beta-Zielgenen zu regulieren, wodurch Zellzyklusarretierung, Apoptose, Differenzierung und extrazelluläre Matrixproduktion gesteuert werden.
• Nicht-kanonische Signalgebung: Zusätzlich zum kanonischen SMAD-Weg aktiviert TGFBR2 SMAD-unabhängige Kaskaden, darunter MAP-Kinase-, PI3K/AKT- und Rho-ähnliche GTPase-Wege, um Zellmigration, Proliferation und Überleben zu modulieren.
• Ligandenbindung und Affinität: TGFBR2 bindet TGFB1, TGFB2 und TGFB3 im pikomolaren Affinitätsbereich ohne Ko-Rezeptoren zu benötigen und vermittelt so den ersten Schritt der TGF-beta-Signaltransduktion.
• Subzelluläre Lokalisation: TGFBR2 befindet sich hauptsächlich auf der Zellmembran und in Membranrafts, wobei eine sekretierte Form in extrazellulären Umgebungen nachgewiesen wurde, was mit seiner Rolle in der Zell-Zell-Kommunikation übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen: Der Rezeptor ist ein Glykoprotein mit mehreren intramolekularen Disulfidbindungen, die für seine Tertiärstruktur essenziell sind. Er wird an Serin- und Threoninresten in seiner Kinasedomäne und im zytoplasmatischen Schwanz phosphoryliert, was die Aktivität und die nachgeschaltete Signalgebung moduliert.
• Zusammenfassung der Schlüsselwörter: Der UniProt-Eintrag hebt die Beteiligung an Apoptose, Wachstumsregulation, Differenzierung und Krankheitsassoziationen wie Aortenaneurysma, Kraniosynostose und hereditärem nicht-polypösem kolorektalen Krebs hervor.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Immunogen-Design: Der Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein gerichtet, das die Aminosäuren 23–280 des humanen TGFBR2 umfasst und die N-terminale extrazelluläre Ligandenbindungsdomäne abdeckt. Diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte relativ konserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität erklärt; endogene Glykosylierungsmuster können jedoch die Epitopzugänglichkeit in nativen Proben beeinflussen.
• Hinweise für Western Blot (WB): Das vorhergesagte Molekulargewicht von TGFBR2 beträgt etwa 65 kDa; aufgrund der Glykosylierung kann es jedoch zu einer Bandenverschiebung kommen. Verwenden Sie reduzierende Bedingungen für eine klare Auflösung. Validieren Sie in Positivkontrolllysaten (z. B. HeLa, A549), von denen bekannt ist, dass sie TGFBR2 exprimieren.
• Tipps für Immunhistochemie (IHC-P): Für Paraffineinbettete Schnitte optimieren Sie die Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer pH 6,0 oder EDTA pH 9,0) und erwägen Sie das Testen mehrerer Konzentrationen des Primärantikörpers (typischer Bereich 1:50–1:500). Es ist eine Membranfärbung zu erwarten; die Zugabe eines Phosphatasehemmers zu Blockierungspuffern kann helfen, phosphorylierungsabhängige Epitope zu erhalten.
• Anleitung für Immunfluoreszenz (IF/ICC): Da TGFBR2 ein Transmembranrezeptor ist, ist eine Permeabilisierung mit Triton X-100 oder Saponin für den Nachweis intrazellulärer Epitope erforderlich. Eine Co-Färbung mit Membran- oder Organellenmarkern wird empfohlen, um die Lokalisation zu bestätigen. Der Antikörper kann auch die sekretierte Form erkennen, daher wird eine sorgfältige Fixierung empfohlen, um extrazellulären Hintergrund zu vermeiden.
• Verwendung in ELISA: Dieser polyclonale Antikörper kann als Capture- oder Nachweisreagenz in Sandwich-ELISA-Formaten verwendet werden. Führen Sie Schachbrett-Titrationen durch, um die optimale Beschichtungs- (1–10 µg/mL) und Nachweiskonzentration zu bestimmen, und validieren Sie mit rekombinanten TGFBR2-Proteinstandards.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio bietet einen optimierten Einzelanbieter-Erlebnis für Diagnostikhersteller und Forschungslabore, die hochwertige Rohstoffe für TGF-beta-Signalwegstudien, Fibrose- und Onkologie-Assay-Entwicklung suchen. Wir liefern validierte Antikörperpaare, optimierte monoklonale und polyklonale Antikörper wie diesen TGFBR2-Kaninchen-pAb, Bulk-Hilfsreagenzien und kundenspezifische Rohstoffbeschaffung. Egal, ob Sie einen bestehenden Immunoassay skalieren oder ein neues Biomarker-Nachweispanel entwickeln, CamelBio ist Ihr integrierter Partner von der Idee bis zur Klinik.