Anti-TGF-beta-1-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P01137

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TGF-beta 1

• TGFB1 kodiert ein Proprotein, das in das latenzassoziierte Peptid (LAP) und das aktive TGF-beta-1-Zytokin gespalten wird; LAP hält TGF-beta-1 während der Speicherung in der extrazellulären Matrix in einem latenten Zustand und reguliert dessen Aktivierung. Zugehörige Referenzen: PMID:28117447 PMID:29109152
• TGF-beta-1 ist ein multifunktioneller Wachstumsfaktor, der an Zellproliferation, Differenzierung, Immunregulation und Gewebehomöostase beteiligt ist. Es signalisiert über die Rezeptoren TGFBR1/TGFBR2 und aktiviert die SMAD2/3-vermittelte Transkription. Zugehörige Referenz: PMID:20207738
• Die Kontrolle der TGF-beta-1-Latenz umfasst Wechselwirkungen mit Umgebungs- und Matrixmolekülen wie LTBP1, LRRC32/GARP (auf Tregs) und LRRC33/NRROS (in Makrophagen/Mikroglia). Die Integrine ITGAV:ITGB6 oder ITGAV:ITGB8 binden an LAP und lösen eine Konformationsänderung aus, die aktives TGF-beta-1 freisetzt. Zugehörige Referenzen: PMID:19651619 PMID:19750484 PMID:2022183 PMID:22278742 PMID:28117447
• TGF-beta-1 stimuliert über die regulierte intramembranäre Proteolyse von CREB3L1 eine anhaltende Kollagenproduktion in Osteoblasten und fördert durch Chemotaxis und Differenzierung von Osteoblasten die Knochenbildung. Zugehörige Referenz: PMID:25310401
• TGF-beta-1 induziert über die Phosphorylierung von SMAD2/3 den epithelial-mesenchymalen Übergang (EMT) und die Zellmigration – Prozesse, die für die Entwicklung und die Metastasierung von Krebs entscheidend sind. Zugehörige Referenzen: PMID:25893292 PMID:30696809
• Stark exprimiert in Knochengewebe, Gelenkknorpel und Chondrozyten; die Expressionslevel sind in Osteoarthrose-Läsionen erhöht, wo es mit ASPN kolokalisiert. Zugehörige Referenzen: PMID:11746498 PMID:17827158
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören die Spaltung an basischen Resten, die N-Glykosylierung und die Bildung mehrerer Disulfidbrücken, die für eine korrekte Faltung und Latenz essenziell sind.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 291–390 innerhalb der reifen TGF-beta-1-Domäne. Bei WB ist zu beachten, dass der Antikörper unter reduzierenden Bedingungen möglicherweise das gespaltene reife Monomer (~12,5 kDa) erkennt, während unter nicht reduzierenden Bedingungen das 44-kDa-Proprotein oder Disulfid-verknüpfte Dimere sichtbar werden können. Validieren Sie die Bandenmuster in Ihrem Probensystem.
• Für IF/ICC sollte eine Permeabilisierung eingesetzt werden, um intrazelluläres TGF-beta-1 im Golgi-Apparat/in sekretorischen Vesikeln nachzuweisen; bei sezernierten Zielstrukturen kann eine Behandlung mit Brefeldin A zur Blockierung der Sekretion in Betracht gezogen werden.
• Bei ELISA kann der Antikörper zum Einfangen/Nachweis von TGF-beta-1 verwendet werden. Wenn Gesamt-TGF-beta-1 in biologischen Flüssigkeiten gemessen wird, kann eine Vorbehandlung zur Aktivierung latenter Komplexe (z. B. Säureaktivierung) erforderlich sein.
• Eine Kreuzreaktivität mit TGF-beta-1 von Maus und Ratte wurde berichtet; überprüfen Sie die Leistungsfähigkeit bei Verwendung nicht humaner Proben.

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