Anti-TGF beta 1 monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01137

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von TGF beta 1

• TGFB1 kodiert das Transforming Growth Factor Beta-1-Proprotein, das proteolytisch gespalten wird, um das Latenz-assoziierte Peptid (LAP) und das biologisch aktive TGF-beta-1-Zytokin zu erzeugen.
• TGF-beta-1 wird als inaktiver latenter Komplex sezerniert; die Aktivierung erfolgt, wenn Integrine (ITGAV:ITGB6 oder ITGAV:ITGB8) an LAP binden, was zu einer konformationellen Verzerrung und Freisetzung des aktiven Zytokins führt (PubMed:22278742, PubMed:28117447). Verwandte Referenzen: PMID:22278742 PMID:28117447
• Aktives TGF-beta-1 signalisiert über TGF-beta-Rezeptoren (TGFBR1 und TGFBR2), was zur Phosphorylierung von SMAD2/3 und deren Translokation in den Zellkern führt, um die Genexpression zu regulieren (PubMed:20207738, PubMed:25893292, PubMed:29483653, PubMed:30696809). Verwandte Referenzen: PMID:20207738 PMID:25893292 PMID:29483653 PMID:30696809
• Es ist ein multifunktionelles Zytokin, das den epithelial-mesenchymalen Übergang (EMT), die Zellmigration und eine anhaltende Kollagenproduktion durch Aktivierung von CREB3L1 induzieren kann (PubMed:25310401, PubMed:25893292, PubMed:30696809). Verwandte Referenzen: PMID:25310401 PMID:25893292 PMID:30696809
• TGF-beta-1 moduliert die Differenzierung von Immunzellen: Bei hohen Konzentrationen fördert es die Entwicklung regulatorischer T-Zellen (Treg), während es bei niedrigen Konzentrationen zusammen mit IL-6/IL-21 die Differenzierung von Th17-Zellen begünstigt (nach Homologie).
• Im Knochen ist es stark exprimiert und wirkt als potenter Stimulator der osteoblastären Knochenbildung, Chemotaxis, Proliferation und Differenzierung; es ist auch im Gelenkknorpel reichlich vorhanden und bei Arthrose erhöht (PubMed:11746498, PubMed:17827158). Verwandte Referenzen: PMID:11746498 PMID:17827158
• Die subzelluläre Lokalisation erfolgt primär in den extrazellulären Raum und die extrazelluläre Matrix.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Spaltung an dibasischen Resten, die Bildung von Disulfidbrücken und die Glykosylierung, die für eine korrekte Faltung und Dimerisierung unerlässlich sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 279–390 des humanen TGFB1-Proproteins) liegt innerhalb der LAP-Domäne; daher erkennt der Antikörper möglicherweise das全长-Proprotein und LAP, aber nicht unbedingt das reife TGF-β1-Dimer. Validieren Sie die Nachweisspezifität unter Verwendung geeigneter rekombinanter Proteine oder Zelllysate.
• Für Western Blot ist ein Band um 44 kDa zu erwarten, das dem Proprotein unter reduzierenden Bedingungen entspricht; der reife Monomer (~12,5 kDa) wird möglicherweise beobachtet oder nicht, je nach Epitop-Zugänglichkeit.
• Für Immunhistochemie und Immunfluoreszenz sollten Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen und Fixierungsmethoden berücksichtigen, insbesondere bei der Arbeit mit Geweben, die reich an extrazellulärer Matrix sind (z. B. Knochen, Knorpel), wo latente Komplexe akkumulieren.
• Die ELISA-Leistung kann durch Beschichtung mit rekombinantem LAP oder Proprotein und Testen von seriellen Verdünnungen des Antikörpers bewertet werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wird berichtet, wir empfehlen jedoch, die Bindung im verwendeten spezifischen experimentellen System zu verifizieren.

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