Anti-TFPI Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB, ELISA - P10646

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: TFPI-Funktion und Lokalisierung

• TFPI (Tissue factor pathway inhibitor / Gewebsfaktorweg-Inhibitor), auch bekannt als Extrinsischer Weg-Inhibitor (EPI) oder Lipoprotein-assoziierter Koagulationsinhibitor (LACI), ist ein Serinprotease-Inhibitor vom Kunitz-Typ, der den extrinsischen Koagulationsweg zentral reguliert.
• Es hemmt direkt den Faktor Xa und hemmt abhängig von Faktor Xa den Gewebsfaktor/Faktor-VIIa-Komplex, wodurch die Thrombinbildung unterdrückt wird und antithrombotische Wirkungen entfaltet werden.
• TFPI wird hauptsächlich in Endothelzellen synthetisiert – passend zu seiner Rolle bei der vaskulären Hämostase – und in den Blutstrom sezerniert.
• Das Protein bindet an Lipoproteine im Plasma und ist zudem über einen GPI-Anker an der Mikrosomenmembran verankert, sodass sowohl lösliche als auch membrangebundene Formen existieren.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-Glykosylierung, die Bildung von Disulfidbindungen und eine C-terminale GPI-Ankerbindung, die entscheidend für die Stabilität und Lokalisierung des Proteins sind.
• Durch alternatives Spleißen des TFPI-Gens entstehen mehrere Isoformen, die sich in ihren C-terminalen Regionen und der Affinität für Lipoproteine und Zelloberflächen unterscheiden können.
• Aufgrund seiner inhibitorischen Funktion ist TFPI ein wichtiger gerinnungshemmender Faktor; Mängel oder Fehlregulation werden mit thrombotischen Erkrankungen in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 29-224 von menschlichem TFPI und deckt die Kunitz-Domäne 1 ab; dies deutet auf eine Eignung zum Nachweis von TFPI-Isoformen hin, die diese Region enthalten, in Proben von Mensch, Maus und Ratte.
• Für den Western Blot liegt die vorhergesagte Bande bei etwa 35 kDa; Glykosylierung und eine potenzielle Entfernung des GPI-Ankers können jedoch zu mehreren Banden oder Schmiere in Zelllysaten oder Plasmaproben führen.
• Um unspezifische Bindung, die bei polyclonalen Antikörpern typisch ist, zu reduzieren, sollten Sie bei komplexen Proben wie Serum die Blockierungs- und Waschbedingungen optimieren.
• Für ELISA-Anwendungen wird TFPI sezerniert, daher sind Plasma oder Kulturüberstände geeignete Probentypen.
• Validieren Sie die Antikörperleistung unter Ihren spezifischen experimentellen Bedingungen, da eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-TFPI berichtet wurde, aber eine Verifizierung im jeweiligen Probensystem erforderlich ist.

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