Anti-TFEB Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P19484

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TFEB

• Transkriptionsfaktor EB (TFEB), ein Mitglied der MiT/TFE-Familie (auch bekannt als bHLHe35), fungiert als Masterregulator der lysosomalen Biogenese, Autophagie und des Energiestoffwechsels (PubMed:21617040, PubMed:22343943, PubMed:22576015). Verwandte Referenzen: PMID:21617040 PMID:22343943 PMID:22576015
• Die Nährstoffverfügbarkeit steuert die TFEB-Aktivität: MTOR-abhängige Phosphorylierung fördert die zytosolische Retention; starvation-induzierte Dephosphorylierung löst den Kerneintrag und die transkriptionelle Aktivierung von lysosomalen und Autophagie-Genen aus (PubMed:22343943, PubMed:22576015, PubMed:22692423). Verwandte Referenzen: PMID:22343943 PMID:22576015 PMID:22692423
• Dimerisierung mit anderen Mitgliedern der MiT/TFE-Familie wie TFE3 oder MITF ist für die effiziente DNA-Bindung an E-Box- und CLEAR-Box-Promotorsequenzen erforderlich (PubMed:1748288, PubMed:19556463, PubMed:29146937). Verwandte Referenzen: PMID:1748288 PMID:19556463 PMID:29146937
• TFEB reguliert die Positionierung von Lysosomen durch Induktion der PIP4P1-Expression und treibt die Autophagie bei Glukosemangel in Kooperation mit ACSS2 an (PubMed:29146937, PubMed:28552616). Verwandte Referenzen: PMID:29146937 PMID:28552616
• In der adaptiven Immunität aktiviert TFEB die CD40L-Expression in T-Zellen und trägt so zu thymusabhängigen Antikörperantworten bei (Nach Ähnlichkeit).
• Das Protein lokalisiert sich im Zellkern, Zytoplasma und an der Lysosomenmembran, wobei sein Shuttling dynamisch durch Nährstoff- und Stresssignale gesteuert wird.
• Bei bakteriellen Infektionen induziert die Itaconat-vermittelte Alkylierung von TFEB die nukleäre Translokation und lysosomale Biogenese, was die Bakterienbeseitigung erleichtert (PubMed:35662396). Verwandte Referenzen: PMID:35662396
• TFEB spielt außerdem eine Rolle bei der vaskulären Entwicklung der Plazenta (Nach Ähnlichkeit) und unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die C-terminale Region (Aminosäuren 391-461) des menschlichen TFEB ab, die möglicherweise vollständiges TFEB und Varianten mit posttranslationalen Modifikationen erkennt; validieren Sie die Spezifität in Ihrem entsprechenden Proben-system.
• Für Western Blot ist eine Bande um 52 kDa zu erwarten; erwägen Sie die Verwendung von Protokollen zur nukleären/zytoplasmatischen Fraktionierung, um die TFEB-Translokation als Reaktion auf Stimuli zu verfolgen.
• Bei IHC-P sollten Antigen-Retrieval und die Verdünnung des Primärantikörpers optimiert werden; schließen Sie Positivkontrollgewebe ein, von dem bekannt ist, dass es TFEB exprimiert (z. B. Niere, Leber) sowie geeignete Negativkontrollen.
• Für IF/ICC stellen Sie sicher, dass Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen die Kernmorphologie erhalten; Co-Färbung mit lysosomalen Markern kann den TFEB-Aktivierungsstatus beurteilen.
• Bei Verwendung von ELISA titrieren Sie den Antikörper sorgfältig und schließen Sie relevante Blockierungs- und Waschschritte ein, um den Hintergrund zu minimieren.

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