Anti-TFE3 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P19532

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: TFE3-Funktion und Lokalisierung

• TFE3 ist ein Transkriptionsfaktor, der mit sich selbst oder anderen Mitgliedern der MiT/TFE-Familie wie TFEB oder MITF dimerisiert, um an E-Box-Sequenzen (5'-CANNTG-3') zu binden und die Genexpression zu regulieren. Zugehörige Referenzen: PMID:24448649

• Dient als Hauptregulator der lysosomalen Biogenese, indem er spezifisch die CLEAR-Box-Sequenz (5'-GTCACGTGAC-3') in den Promotoren lysosomaler Gene erkennt und deren Expression aktiviert. Zugehörige Referenzen: PMID:24448649

• Die TFE3-Aktivität wird streng durch mTOR-abhängige Phosphorylierung kontrolliert: Unter nährstoffreichen Bedingungen phosphoryliert mTOR TFE3, was die zytoplasmatische Retention und Inaktivierung fördert; bei Hunger oder lysosomalem Stress führt die Dephosphorylierung zur Translokation in den Zellkern und zur transkriptionellen Aktivierung. Zugehörige Referenzen: PMID:24448649, PMID:31672913, PMID:36608670

• Erhält den pluripotenten Zustand hämatopoetischer Stammzellen durch Förderung der Expression von Pluripotenzgenen aufrecht; die mTOR-abhängige zytoplasmatische Retention von TFE3 fördert den Austritt aus der Pluripotenz. Zugehörige Referenzen: PMID:30733432

• Erkennt die MUE3-Box, eine Untergruppe von E-Boxen, die im Immunglobulin-Enhancer vorhanden sind, und bindet an eine USF/MLTF-Stelle, was auf eine Rolle bei der Regulierung der Immunantwort hindeutet. Zugehörige Referenzen: PMID:2338243

• Fördert die lysosomale Positionierung als Reaktion auf Nährstoffmangel durch Induktion der Expression von PIP4P1. Zugehörige Referenzen: PMID:29146937

• Die subzelluläre Lokalisierung verschiebt sich dynamisch zwischen Zytoplasma, Zytosol, Zellkern und Lysosomenmembran, abhängig vom Nährstoffstatus und der mTOR-Signalübertragung.

• Posttranslational modifiziert durch Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung; unterliegt zudem alternativem Spleißen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-160) des humanen TFE3, was die Erkennung mehrerer Isoformen ermöglichen kann. Für Western Blot (WB) liegt das vorhergesagte Molekulargewicht bei etwa 62 kDa; Banden in der Nähe dieser Größe sind zu erwarten.
• Validieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen Probensystem; humanes, Maus- und Ratten-TFE3 gelten als reaktiv. Erwägen Sie die Verwendung von Kernextrakten oder Gesamtzelllysaten für den Nachweis, da TFE3 zwischen den Kompartimenten pendelt.
• Optimieren Sie für ELISA die Beschichtungsbedingungen und die Antikörperverdünnung unter Verwendung bekannter positiver und negativer Kontrollantigene. Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, stellen Sie bei Verwendung in quantitativen Assays die Konsistenz zwischen den Chargen sicher.

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