Kaninchen-polyklonaler Anti-TERT-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – O14746

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: TERT-Funktion und Lokalisation

• Die Telomerase-Reverse-Transkriptase (TERT) ist die katalytische Komponente der Telomerase, eines Ribonukleoprotein-Enzyms, das die Enden der Telomere durch das Hinzufügen von TTAGGG-Wiederholungen aufrechterhält. Sie ist in Vorläufer- und Krebszellen aktiv, in normalen somatischen Zellen jedoch inaktiv oder nur in sehr geringem Maß vorhanden.
• TERT fungiert als RNA-abhängige DNA-Polymerase und katalysiert die Verlängerung chromosomaler 3'-Termini unter Verwendung einer internen RNA-Matrize. Der katalytische Zyklus umfasst die Primerbindung, die Verlängerung sowie die Produktfreisetzung oder Translokation; die Aktivität ist bei Substraten mit 2 oder 3 telomeren Wiederholungen höher.
• Die TERT-Aktivität wird durch mit dem Telomerase-Komplex assoziierte Proteine, Chaperone und Polypeptid-Modifikatoren reguliert. TERT moduliert außerdem die Wnt-Signalübertragung und spielt wichtige Rollen beim Altern und bei der Hemmung der Apoptose.
• Zu den alternativen Bezeichnungen gehören TP2, TRT, CMM9, EST2, TCS1, hTRT, DKCA2, DKCB4, hEST2 und PFBMFT1. Das Gen TERT hat die Synonyme EST2, TCS1 und TRT.
• Die subzelluläre Lokalisation ist hauptsächlich nukleär und umfasst den Nukleolus, das Nukleoplasma und die Telomere; TERT befindet sich jedoch auch in PML-Körperchen und im Zytoplasma.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation. TERT wird mit der Aufrechterhaltung der Telomere, der reversen Transkription und Krankheitsvarianten wie der Dyskeratosis congenita in Verbindung gebracht.
• Gewebespezifität: hohe Expression in Subpopulationen von Thymozyten, mittlere Expression in T-Lymphozyten der Tonsillen und niedrige bis nicht nachweisbare Expression in T-Lymphozyten des peripheren Blutes.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid innerhalb der Aminosäuren 1050–1132 des humanen TERT und zielt auf eine C-terminale Region ab. Berücksichtigen Sie die Lage dieses Epitops bei der Entwicklung komplementärer Nachweisreagenzien.
• Für WB weist TERT ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 127 kDa auf. Verwenden Sie reduzierende Bedingungen und Erhitzen, um Komplexe zu dissoziieren. Beachten Sie, dass phosphorylierte oder modifizierte Formen anders migrieren können; verwenden Sie geeignete Lysate von Krebszelllinien als Positivkontrollen.
• Bei IHC-P sind in telomerasepositiven Geweben nukleäre und nukleoläre Färbemuster zu erwarten. Optimieren Sie die Methoden zur Antigenrückgewinnung und validieren Sie diese mit bekannten positiven und negativen Gewebeproben.
• Für ELISA kann dieser polyklonale Antikörper je nach Assayformat als Fänger- oder Nachweisantikörper verwendet werden. Die Kombination mit einem validierten monoklonalen Antikörper kann die Spezifität in Sandwich-ELISA-Ansätzen verbessern.
• Als polyklonaler Antikörper sollte die Chargen-zu-Chargen-Variabilität vom Endanwender bewertet werden. Validieren Sie die Leistung vor der routinemäßigen Anwendung im spezifischen Probensystem und für die jeweilige Anwendung.

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