Monoklonaler Anti-TERT-Antikörper für WB, ELISA - O14746

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: TERT-Funktion und Lokalisation

• Die Telomerase-Reverse-Transkriptase (TERT) ist die katalytische Untereinheit des ribonukleoproteinischen Telomerasekomplexes und für die de-novo-Anlagerung von Telomerwiederholungen an die Chromosomenenden unerlässlich.
• Das Enzym durchläuft die Schritte Primerbindung, Nukleotidanlagerung, Translokation und Freisetzung und fügt die hexamere Wiederholung 5’-TTAGGG-3’ an. Es ist hauptsächlich in Stammzellen, Keimzellen und der Mehrzahl der Krebszellen aktiv, während es in den meisten normalen somatischen Geweben stillgelegt ist.
• Neben der Verlängerung der Telomere moduliert TERT die Wnt-Signalübertragung und beeinflusst die zelluläre Alterung sowie antiapoptotische Signalwege.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen. Das Volllängenprotein befindet sich überwiegend im Zellkern und lokalisiert in Nukleolen, im Nukleoplasma und an den Telomeren, wird jedoch auch in zytoplasmatischen PML-Körpern nachgewiesen.
• Die TERT-Expression ist gewebespezifisch: In Subpopulationen von Thymozyten ist sie am höchsten, in tonsillären T-Lymphozyten intermediär und in peripheren T-Zellen des Blutes niedrig bis nicht nachweisbar.
• Das Protein unterliegt einer Phosphorylierung und fungiert als DNA-bindende, metallabhängige Nukleotidyltransferase, die für die Katalyse Magnesium benötigt.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (Aminosäuren 1000–1132) des humanen TERT, die bei Mensch, Maus und Ratte hochkonserviert ist und die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Beim Western Blot ist eine Bande bei etwa 127 kDa zu erwarten. Zusätzliche niedrigere Banden können auf Spleißvarianten oder einen Abbau hinweisen. Verwenden Sie geeignete Positivkontrollen, beispielsweise HeLa-Zellen oder Maus-Hodenlysat, und validieren Sie die Ergebnisse unter Ihren spezifischen experimentellen Bedingungen.
• Bei ELISA können rekombinantes TERT-Protein oder das Immunogen als Beschichtungsantigen verwendet werden. Sowohl indirekte als auch Sandwich-Formate können geeignet sein.
• Da die TERT-Expression häufig niedrig ist, können eine Anreicherung, beispielsweise durch Kernextrakte, oder eine Signalverstärkung die Nachweisempfindlichkeit erhöhen.
• Obwohl eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte angegeben ist, sollte die Leistung stets in Ihrem spezifischen Probensystem durch Tests mit geeigneten Positiv- und Negativkontrollen bestätigt werden.

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