Anti-TEK (TIE2) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q02763

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von TEK (Angiopoietin-1-Rezeptor)

• TEK ist ein Tyrosin-Proteinkinase-Zelloberflächenrezeptor für Angiopoietine (ANGPT1, ANGPT2, ANGPT4), der die Angiogenese, das Überleben, die Proliferation, die Migration, die Adhäsion und die Zytoskelett-Reorganisation von Endothelzellen kritisch reguliert.
• Er erhält die vaskuläre Ruhe, indem er das Austreten proinflammatorischer Plasmaproteine und Leukozyten verhindert und gleichzeitig die vaskuläre Stabilität im ruhenden Endothel fördert.
• Die TEK-Signalgebung ist kontextabhängig: In ruhenden Gefäßen mit engen Zell-Zell-Kontakten rekrutiert ANGPT1 TEK zu interzellulären Verbindungen und aktiviert bevorzugt den PI3K/AKT1-Weg; in migrierenden Endothelzellen ohne Adhäsionen lokalisiert sich TEK zu fokalen Adhäsionen und stimuliert die Sprossungsangiogenese über die PTK2/FAK- und MAPK1/ERK2/MAPK3/ERK1-Kaskaden.
• Eine Modulation erfolgt durch niedrigeraffines ANGPT2, das als kompetitiver Antagonist von ANGPT1 wirken kann, durch Heterodimerisierung mit TIE1 und durch proteolytische Spaltung, die einen löslichen extrazellulären Köderrezeptor freisetzt.
• Subzellulär kommt TEK an der Zellmembran, den Zell-Zell-Verbindungen und den fokalen Adhäsionen vor und wird auch im Zytoplasma nachgewiesen, wo es mit dem Zytoskelett assoziiert ist, sowie als lösliches Ektodomainen sezerniert.
• Die Expression ist vorwiegend in Endothelzellen und ihren Vorläufern (Angioblasten) zu finden, mit den höchsten Werten in Plazenta und Lunge; die lösliche Form ist im Blutplasma nachweisbar.
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• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen die ligandenabhängige Autophosphorylierung an Tyrosinresten, Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Ubiquitinierung.
• TEK ist essentiell für die embryonale Angiogenese, die Herzentwicklung und die postnatale Hämatopoese.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 500–750 innerhalb der zytoplasmatischen Domäne ab; es wird erwartet, dass der Antikörper den intrazellulären Teil von TEK erkennt. Für den Western Blot sollte unter reduzierenden Bedingungen ein Band bei ca. 126 kDa nachgewiesen werden; erwägen Sie die Verwendung von membranangereicherten oder Ganzzell-Lysaten aus Endothelzellen.
• Die Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte ermöglicht Studien über gängige Modellorganismen. Validieren Sie die speziespezifische Reaktivität in Ihrem experimentellen System vor der Verwendung.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Paarung mit einem Detektionsantikörper gegen ein nicht überlappendes Epitop die Empfindlichkeit verbessern. Optimieren Sie die Antigenbeschichtung und die Blockierungsbedingungen für Ihr Plattenformat.
• Die proteolytische Verarbeitung erzeugt ein lösliches extrazelluläres Fragment von ~75 kDa; dies kann in konditioniertem Medium oder Plasmaproben auftreten. Passen Sie die Probenvorbereitung entsprechend an, wenn Sie auf den extrazellulären Teil abzielen.

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