Anti-TDP-43/TARDBP monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF, IHC, ChIP - Q13148

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TDP-43-Funktion und Lokalisierung

• TAR DNA-bindendes Protein 43 (TDP-43) wird durch das TARDBP-Gen kodiert und ist auch als ALS10 bekannt. Es gehört zur hnRNP-Familie und enthält zwei RNA-Erkennungsmotive (RRMs) und eine glycinreiche C-terminale Domäne.
• Fungiert als RNA-bindendes Protein, das an mehreren Schritten der RNA-Biogenese und -Prozessierung beteiligt ist (PubMed:23519609). Verwandte Referenzen: PMID:23519609
• Bindet bevorzugt über seine RRMs an GU-Wiederholungen, lokalisiert in langen Introns und 3'UTRs von mRNAs und reguliert so das Spleißen vieler RNAs, einschließlich solcher, die für das neuronale Überleben und Neurodegeneration kritisch sind (PubMed:23519609, PubMed:24240615, PubMed:24464995, PubMed:21358640, PubMed:29438978). Verwandte Referenzen: PMID:23519609, PMID:24240615, PMID:24464995, PMID:21358640, PMID:29438978
• Spielt eine Rolle bei der Aufrechterhaltung der mitochondrialen Homöostase durch die Prozessierung mitochondrialer Transkripte (PubMed:28794432) und reguliert die mRNA-Stabilität durch Rekrutierung der Deadenylase an die 3'UTR (PubMed:30520513). Verwandte Referenzen: PMID:28794432, PMID:30520513
• Assoziiert als Reaktion auf oxidativen Stress mit Stressgranula und blockierten Ribosomen, um das Zellüberleben zu fördern (PubMed:19765185, PubMed:23398327). Verwandte Referenzen: PMID:19765185, PMID:23398327
• Lokalisiert im Zellkern, Zytoplasma, Stressgranula und Mitochondrien. Ubiquitär exprimiert, mit besonders hohen Spiegeln in Bauchspeicheldrüse, Plazenta, Lunge, Genitaltrakt und Milz.
• Unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Funktion und sein Aggregationspotenzial regulieren. Mutationen und Fehllokalisierung werden mit Amyotropher Lateralsklerose (ALS) und frontotemporaler Lobärdegeneration (FTLD) in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen zielt auf die C-terminale Region (aa 300–400) von humanem TDP-43 ab, die sowohl die Voll- als auch die gespaltene Form erkennen kann; dies ist bei der Interpretation von Bandenmustern im Western Blot zu berücksichtigen.
• Für den Western Blot ist eine vorherrschende Bande bei etwa 45 kDa zu erwarten; verwenden Sie geeignete positive Kontrollen wie HeLa- oder Hirngewebelysate und validieren Sie dies in Ihrem Proben-System.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde dokumentiert; bestätigen Sie die Leistung in Ihren experimentellen Einstellungen, insbesondere für die Immunhistochemie, wo Fixierung und Antigen-Retrieval die Färbung beeinflussen können.
• Optimieren Sie bei der Immunhistochemie (IHC) das Antigen-Retrieval (z.B. Citratpuffer pH 6,0 oder EDTA pH 9,0) und die Nachweisbedingungen für jeden Gewebetyp.
• Für die Immunpräzipitation (IP) und Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) überprüfen Sie die Eignung des Antikörpers für die native Proteinbindung; beachten Sie, dass TDP-43 hauptsächlich ein RNA-bindendes Protein ist und DNA-Interaktionen eine Optimierung der Vernetzung erfordern können.
• Dieser Antikörper wurde in ELISA verwendet; jedoch sollten individuelle Assay-Bedingungen (z.B. Beschichtungspuffer, Blockierungsmittel) optimiert werden, um die gewünschte Sensitivität zu erreichen.

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