Anti-TCIRG1-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA – Q13488

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der TCIRG1/V-ATPase-Untereinheit a3

• TCIRG1 (T-Zell-Immunregulator 1, auch bekannt als ATP6V0A3, OC116, a3) codiert die 116-kDa-Untereinheit a3 des V0-Komplexes der vakuolären H⁺-ATPase (V-ATPase), eines aus mehreren Untereinheiten bestehenden Enzyms, das für die Ansäuerung intrazellulärer Kompartimente und bei einigen Zelltypen auch der extrazellulären Umgebung verantwortlich ist.
• Die V-ATPase besteht aus einem peripheren V1-Komplex, der ATP hydrolysiert, und einem membranintegralen V0-Komplex, der Protonen transloziert; die a3-Untereinheit ist für die Protonentranslokation über Membranen essenziell.
• TCIRG1 ist direkt an der T-Zell-Aktivierung beteiligt, wie durch Hinweise auf seine Rolle bei der Regulation von Immunzellen gestützt wird (PubMed:10329006).
  Zugehörige Referenz: PMID:10329006
• Mutationen in TCIRG1 stehen mit autosomal-rezessiver Osteopetrose in Verbindung und unterstreichen seine entscheidende Funktion bei der von Osteoklasten vermittelten Knochenresorption und pH-Regulation.
• Das Protein weist eine Isoformvielfalt auf: Die lange Isoform wird in Osteoklastomen stark exprimiert, während die kurze Isoform überwiegend im Thymus exprimiert wird.
• Auf subzellulärer Ebene ist TCIRG1 ein Transmembranprotein, das in der Membran intrazellulärer Vesikel und der Plasmamembran lokalisiert ist, wo es zur Aufrechterhaltung der pH-Homöostase beiträgt.
• Zu den wichtigsten biologischen Schlüsselbegriffen gehören alternatives Spleißen, Krankheitsvariante, Wasserstoffionentransport, Ionentransport, Membran, Osteopetrose und Transmembranhelix.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1–356 des humanen TCIRG1, einer großen zytoplasmatischen N-terminalen Domäne. Diese Region ist wahrscheinlich gut zugänglich und kann die Erkennung sowohl unter nativen als auch unter denaturierenden Bedingungen erleichtern, wodurch Anwendungen wie WB und IHC-P unterstützt werden.
• Beim Western Blot ist eine Bande bei etwa 93 kDa zu erwarten. Es sollten geeignete denaturierende Bedingungen in Betracht gezogen werden, da das Protein aufgrund seiner Transmembrandomänen aggregieren kann.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC und IF-P) ist eine Permeabilisierung erforderlich, um das intrazelluläre, membrangebundene Protein nachzuweisen. Verwenden Sie geeignete Kontrollen, um die Spezifität zu überprüfen.
• Bei der Verwendung von IHC-P können Methoden zur Antigen-Retrieval, beispielsweise die hitzeinduzierte Epitop-Retrieval-Methode, die Färbung verbessern, insbesondere bei formalinfixiertem Gewebe.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenorthologen ermöglicht potenziell den Einsatz in Nagetiermodellen. Die Expression und Spezifität sollten jedoch im relevanten Gewebe oder in der entsprechenden Zelllinie validiert werden.
• Für ELISA kann der Antikörper zum Einfangen oder Nachweisen des rekombinanten Immunogens geeignet sein. Es ist jedoch zu beachten, dass der multimerische Zustand des nativen Proteins die Bindung in komplexen Proben beeinflussen kann.

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