Anti-TBC1D4 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O60343

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TBC1D4-Funktion und Lokalisierung

• TBC1D4 (TBC1-Domänen-Familienmitglied 4), auch bekannt als AS160 (Akt-Substrat von 160 kDa), ist ein GTPase-aktivierendes Protein (GAP), das kleine Rab-GTPasen wie RAB2A, RAB8A, RAB10 und RAB14 reguliert und den intrazellulären Vesikeltransport steuert.
• Isoform 2 von TBC1D4 fördert die insulininduzierte Translokation des Glukosetransporters SLC2A4/GLUT4 zur Plasmamembran und erhöht so die Glukoseaufnahme – ein kritischer Prozess in der Stoffwechselregulation.
• TBC1D4 ist weit verbreitet exprimiert, wobei Isoform 1 stark in Skelettmuskel und Herz exprimiert wird, während Isoform 2 starke Expression in Nebennieren und Schilddrüse, Lunge, Niere, Dickdarm, Gehirn und Fettgewebe zeigt.
• Auf Proteinebene wird TBC1D4 in Pankreasinseln (einschließlich Beta-Zellen) exprimiert, und seine Expression ist bei Typ-2-Diabetes-Patienten zweifach verringert, was es mit der Diabetes-Pathologie in Verbindung bringt.
• TBC1D4 ist ein zytoplasmatisches Protein, das mehrere posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung und Methylierung durchläuft, die seine Aktivität und subzelluläre Lokalisierung modulieren.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen von TBC1D4, was zu seiner gewebespezifischen funktionellen Vielfalt beiträgt.
• TBC1D4 ist in T-Zellen von Patienten mit atopischer Dermatitis hochreguliert, was auf potenzielle Rollen in der Immunfunktion hindeutet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot ist ein Band bei etwa 147 kDa zu erwarten; erwägen Sie die Verwendung einer Hochmolekulargewichts-Proteinleiter und optimierter Transferbedingungen für große Proteine.
• Die Immunogensequenz (aa 1059–1298) liegt stromabwärts des bekannten Phospho-Akt-Substratmotivs; überprüfen Sie je nach experimentellem Bedarf, ob der Antikörper sowohl phosphorylierte als auch nicht phosphorylierte Formen erkennt.
• Dieser Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-TBC1D4; validieren Sie die Spezifität in relevanten Gewebelysaten (z.B. Skelettmuskel, Fettgewebe) und schließen Sie geeignete Kontrollen ein.
• Für Immunfluoreszenz kann die zytoplasmatische Detektion eine Permeabilisierung mit Triton X-100 oder Saponin erfordern; optimieren Sie Fixierung und Blockierung, um die Antigenität zu erhalten und den Hintergrund zu reduzieren.
• Verwenden Sie in ELISA das rekombinante Immunogen als positive Kontrolle, um Standardkurven zu erstellen und die Assay-Empfindlichkeit zu bestimmen.

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