Anti-SUPT5H/SPT5 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00267

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SUPT5H/SPT5 Funktion und Lokalisierung

• SPT5 (SUPT5H) ist die große Untereinheit des DRB-Sensitivitäts-induzierenden Faktor (DSIF)-Komplexes, der die mRNA-Verarbeitung und die Transkriptionsverlängerung durch RNA-Polymerase II reguliert.
  Verwandte Referenzen: PMID:10075709, PMID:10199401, PMID:10421630

• DSIF reguliert das mRNA-Capping positiv, indem es die mRNA-Guanylyltransferase-Aktivität von RNGTT/CAP1A stimuliert.
  Verwandte Referenzen: PMID:10075709, PMID:10421630, PMID:10757782

• DSIF arbeitet mit dem negativen Elongationsfaktor (NELF)-Komplex zusammen, um die transkriptionelle Pause an Promotor-nahen Stellen zu verstärken und so die Assembly eines elongationskompetenten RNA-Polymerase-II-Komplexes zu erleichtern.
  Verwandte Referenzen: PMID:10075709, PMID:10199401, PMID:10757782

• DSIF und NELF fördern das Pausieren, indem sie den Transkriptions-Elongationsfaktor TFIIS/S-II hemmen, der die intrinsische Nuklease-Aktivität der RNA-Polymerase II stimuliert, um blockierte Transkripte zu spalten und die Wiederaufnahme der Transkription zu fördern.
  Verwandte Referenzen: PMID:16214896

• Nach der Phosphorylierung durch CDK9 kann DSIF zu einem positiven Elongationsfaktor wechseln, der eine produktive transkriptionelle Elongation ermöglicht.
  Verwandte Referenzen: PMID:16427012

• SPT5 ist für die HIV-1 Tat-vermittelte transkriptionelle Aktivierung unerlässlich, unterdrückt das Pausieren und verhindert die vorzeitige Beendigung viraler Transkripte.
  Verwandte Referenzen: PMID:10393184, PMID:10454543, PMID:11809800, PMID:11112772, PMID:14701750

• SPT5 lokalisiert sich predominantly im Zellkern und ist ubiquitär in Geweben exprimiert.

• SPT5 unterliegt mehreren post-translationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, was seine dynamische Regulation bei der Transkription widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde aus einem synthetischen Peptid innerhalb der Aminosäuren 800–900 von menschlichem SPT5 (C-terminale Region) entworfen. Diese Region ist wahrscheinlich zwischen Mensch, Maus und Ratte konserviert, was mit der berichteten Kreuzreaktivität übereinstimmt.
• Für Western Blotting (WB) wird endogenes SPT5 bei ca. 121 kDa nachgewiesen. Erwägen Sie die Verwendung von kernangereicherten Lysaten, um das Signal zu verbessern, angesichts der nukleären Lokalisierung.
• In Immunopräzipitations-(IP)-Assays kann die Leistung des Antikörpers von der Zugänglichkeit des Epitops abhängen; validieren Sie dies im entsprechenden Probensystem.
• Für Immunzytochemie (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) ist eine Kernfärbung zu erwarten. Angemessene Permeabilisierungs- und Antigen-Retrieval-Verfahren können für optimale Ergebnisse erforderlich sein.
• Für ELISA-Anwendungen wird empfohlen, den Antikörper mit Capture/Detektions-Antikörpern zu paaren, die nicht überlappende Epitope anzielen, um die Spezifität sicherzustellen.
• Titrieren Sie den Antikörper unter Ihren spezifischen Assay-Bedingungen, da die optimalen Arbeitskonzentrationen je nach Probentyp und Nachweismethode variieren können.

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