Anti-SUMO3 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P55854

Kern-Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SUMO3

• SUMO3 (Small Ubiquitin-related Modifier 3) ist ein Ubiquitin-ähnliches Protein, das vom SUMO3-Gen kodiert wird (GenID: 6612). Es ist ein Mitglied der SUMO-Familie und wird auch als SMT3A, Smt3B, SMT3H1 oder SUMO-2 bezeichnet.
• Im Gegensatz zu Ubiquitin fungiert SUMO3 hauptsächlich als posttranslationale Modifikation, die Proteine nicht zum Abbau markiert; stattdessen kann es die ubiquitin-abhängige Proteolyse antagonisieren. Es wird kovalent als Monomer oder Polymer an Ziel-Lysine gebunden.
• Der Konjugationsprozess erfordert eine E1-Aktivierungsenzym (SAE1-SAE2), ein E2-Konjugationsenzym (UBE2I) und wird durch E3-Ligasen wie PIAS1-4, RANBP2 oder CBX4 gefördert. Zugehörige Referenzen: PMID:11451954, PMID:18538659, PMID:21965678
• SUMO3 ist beteiligt an Kerntransport, DNA-Replikation und -Reparatur, Mitose und Signaltransduktion. Es ist außerdem kritisch für die Regulation der Sumoylierung von SETX. Zugehörige Referenzen: PMID:24105744
• Subzellulär ist SUMO3 im Zytoplasma, im Zellkern und in den PML-Körperchen nachzuweisen.
• Es wird überwiegend in der Leber exprimiert, mit einem vorhergesagten Molekulargewicht von 11,6 kDa (läuft bei ~12 kDa in der SDS-PAGE).
• UniProt-Schlüsselwörter umfassen: 3D-Struktur, alternatives Spleißen, Isopeptidbindung, Proteomik-Identifizierung und Ubl-Konjugationsweg.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Aufgrund der geringen Größe von SUMO3 (~12 kDa) verwenden Sie 15%ige SDS-PAGE-Gele oder Gradientengele für eine optimale Auflösung im Western Blot und sorgen Sie für einen effizienten Transfer auf PVDF-Membranen mit niedrigen Molekulargewichts-Grenzwerten.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) fixieren Sie Zellen mit 4% Paraformaldehyd und permeabilisieren Sie mit 0,1-0,2% Triton X-100, damit der Antikörper Zugang zu im Kern und in PML-Körperchen lokalisiertem SUMO3 hat.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität in relevanten Zelllinien oder Geweben; SUMO3 ist in der Leber hoch exprimiert, sodass HepG2 oder primäre Hepatozyten als Positivkontrolle dienen können.
• Da dieser polyclonale Antikörper sowohl freie als auch konjugierte Formen erkennen kann, sollten Sie 1% SDS oder andere denaturierende Bedingungen verwenden, um unspezifische Bindung im ELISA zu reduzieren.

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