Anti-SUB1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P53999

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SUB1-Funktion und -Lokalisierung

• SUB1 kodiert den aktivierten RNA-Polymerase-II-Transkriptions-Co-Aktivator p15, auch bekannt als positiver Kofaktor 4 (PC4), p14 oder SUB1-Homolog.
• Als allgemeiner Co-Aktivator arbeitet p15/PC4 mit TATA-Box-bindenden Protein-assoziierten Faktoren (TAFs) zusammen und vermittelt funktionelle Wechselwirkungen zwischen stromaufwärts gelegenen Aktivatoren und der allgemeinen transkriptionellen Maschinerie, möglicherweise durch Stabilisierung des multiproteinen Transkriptionskomplexes.
• Das Protein bindet an einzelsträngige DNA und in vitro unspezifisch an doppelsträngige DNA (dsDNA), was auf eine Rolle beim Transkriptionsstart oder der Chromatinbindung hindeutet.
• SUB1 ist im Zellkern lokalisiert, was konsistent mit seiner Funktion bei der transkriptionellen Regulation ist.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und ubiquitinähnliche Konjugation (Isopeptidbindung), die seine Aktivität oder Wechselwirkungen modulieren können.
• Strukturuntersuchungen (Schlüsselwort 3D-Struktur) haben Einblicke in seine DNA-bindenden und Proteininteraktionsflächen gegeben.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1-127 von menschlichem SUB1 und deckt das全长-Protein ab; dieses Design kann sowohl endogene als auch rekombinante Proteine über mehrere Anwendungen hinweg erkennen.
• Für den Western Blot ist ein Band nahe 14 kDa unter denaturierenden und reduzierenden Bedingungen zu erwarten; validieren Sie die Spezifität mit geeigneten Kontrollen und Blockierungsmitteln.
• Die Immunfluoreszenz/ICC sollte eine Kernfärbung zeigen; fügen Sie eine DAPI-Kofärbung und Negativkontrollen ohne Primärantikörper hinzu, um die Lokalisierung zu bestätigen.
• Für die Immunpräzipitation optimieren Sie das Antikörper-zu-Lysat-Verhältnis und erwägen Sie eine Vernetzung, wenn die Ziel-DNA-Interaktion Epitope maskieren könnte.
• Der ELISA-Nachweis kann erfordern, dass das direkte Format im Vergleich zum Sandwich-Format mit rekombinanten Proteinstandards für die Quantifizierung getestet wird.

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