Anti-STING/TMEM173 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper - Q86WV6

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: STING/TMEM173 Funktion und Lokalisierung

• STING1 fungiert als Sensor für zytosolische DNA von Bakterien und Viren und fördert die Produktion von Typ-I-Interferonen (IFN-alpha und IFN-beta). Verwandte Referenzen: PMID:18724357 PMID:18818105 PMID:19433799
• Es erkennt und bindet zyklische Dinukleotide wie bakterielles c-di-GMP und wirtseigenes 2',3'-cGAMP, das von cGAS produziert wird, und zeigt eine Ligandenerkennung, die spezifisch für die 2',3'-Phosphodiester-Bindung ist. Verwandte Referenzen: PMID:21947006 PMID:23258412 PMID:23707065 PMID:23747010 PMID:23910378 PMID:26300263 PMID:26150511
• Nach der Ligandenbindung oligomerisiert STING1, transloziert vom endoplasmatischen Retikulum und wird von TBK1 am pLxIS-Motiv phosphoryliert, was zur Rekrutierung und Aktivierung von IRF3 führt, um Typ-I-Interferone zu induzieren. Verwandte Referenzen: PMID:22394562 PMID:25636800 PMID:29973723
• Zusätzlich zur Interferoninduktion fördert STING1 unabhängig von TBK1 die Autophagie, bildet Autophagosomen, die zytosolische DNA oder Pathogene für den lysosomalen Abbau targeten. Verwandte Referenzen: PMID:30568238 PMID:30842662 PMID:41639454 PMID:41639452
• STING1 befindet sich in mehreren Membrankompartimenten, einschließlich des endoplasmatischen Retikulums, ERGIC, Golgi-Apparat, Autophagosomen, Mitochondrien und der Plasmamembran.
• Ubiquitär exprimiert, mit bemerkenswerter Präsenz in Hautendothelzellen, alveolären Typ-2-Pneumozyten, Bronchialepithel und alveolären Makrophagen. Verwandte Referenzen: PMID:18724357 PMID:18818105 PMID:25029335
• Die antivirale Aktivität wird durch virale Onkoproteine wie HPV E7 und Adenovirus E1A antagonisiert, die die Erkennung zytosolischer DNA verhindern. Verwandte Referenzen: PMID:26405230
• STING1 fungiert als Protonenkanal, der den Protonenefflux vom Golgi-Apparat leitet, um die LC3-Lipidierung während der Autophagie zu erleichtern. Verwandte Referenzen: PMID:37535724

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aa 139-379) umfasst die zyklische Dinukleotid-Bindedomäne und das Phosphorylierungsmotiv, was darauf hindeutet, dass der Antikörper sowohl ungebundene als auch aktivierte STING-Formen erkennen kann; überprüfen Sie dies im entsprechenden experimentellen System.
• Für den Western Blot ist ein Band bei ca. 42 kDa zu erwarten; fügen Sie geeignete positive Kontrollen ein (z. B. Lysate von menschlichen, murinen oder rattigen Zellen, von denen bekannt ist, dass sie STING exprimieren) und erwägen Sie die Verwendung von Phosphatasehemmern während der Lyse, um den Phosphorylierungsstatus zu erhalten.
• Bei der Immunpräzipitation kann die polyklonale Natur STING zusammen mit Interaktionspartnern anreichern; bestätigen Sie die Co-Reinigung mit entsprechenden Kontrollen und optimieren Sie gegebenenfalls die Vernetzungsbedingungen.
• Für die Immunfluoreszenz und Immunhistochemie optimieren Sie die Fixierung und Permeabilisierung, um STING an seinen vorherrschenden ER/Golgi-Membranen zu detektieren; validieren Sie dies mit Organellmarkern.
• In ELISA-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper gegen rekombinantes STING oder Zelllysate, um eine Arbeitskonzentration zu ermitteln, und fügen Sie negative Kontrollen hinzu, um den Hintergrund zu bewerten.

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