Anti-STING/TMEM173 Polyklonaler Antikörper (WB, IHC-P, ELISA) - Q3TBT3

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: STING/TMEM173 Funktion und Lokalisierung

• Facilitator der angeborenen Immunsignalgebung, der als Sensor für zytosolische DNA von Bakterien und Viren wirkt und die Produktion von Typ-I-Interferon (IFN-alpha und IFN-beta) fördert. Verwandte Referenzen: PMID:18818105 PMID:19433799 PMID:19776740
• Cyclischer Dinukleotid-Sensor: bindet bakteriellen Second Messenger c-di-GMP und wirtseigenes cGAMP (2',3'-cGAMP) mit hoher Affinität und löst eine Downstream-Signalgebung aus. Verwandte Referenzen: PMID:21947006 PMID:23258412 PMID:23519410
• Ligandeninduzierte Aktivierung: nach Bindung des Liganden oligomerisiert STING, transloziert vom endoplasmatischen Retikulum und wird von TBK1 am pLxIS-Motiv phosphoryliert, was zur Rekrutierung von IRF3 und Induktion von Typ-I-Interferon führt. Verwandte Referenzen: PMID:25636800 PMID:27324217 PMID:29973723
• cGAMP-Verknüpfungsspezifität: wird bevorzugt durch 2',3'-verknüpftes cGAMP aufgrund seiner vororganisierten Konformation aktiviert, kann jedoch 3'-3'-verknüpftes cGAMP mit geringerer Affinität binden. Verwandte Referenzen: PMID:26300263
• Autophagiefunktion: fördert direkt die Autophagie durch Knospung aus dem ER in COPII-Vesikel, Bildung des ERGIC, das als Membranquelle für die Rekrutierung von WIPI2 und LC3-Lipidierung dient. Nach einer bakteriellen Infektion wird auch eine c-di-GMP-induzierte Retikulophagie beobachtet. Verwandte Referenzen: PMID:30568238 PMID:29056340
• Kann an der Translokon-Funktion teilnehmen und apoptotische Signale durch Assoziation mit MHC-Klasse-II-Molekülen übertragen. Verwandte Referenzen: PMID:18559423
• Subzelluläre Lokalisierung: befindet sich hauptsächlich auf der Membran des endoplasmatischen Retikulums, wandert aber dynamisch zum ERGIC, zum Golgi-Apparat, zu Autophagosomen, zur äußeren Mitochondrienmembran und zur Zellmembran nach Aktivierung.
• Wird in lymphoiden Geweben wie Milz und Thymus sowie auf Proteinebene in dendritischen Zellen exprimiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem C-terminalen Peptid (aa 280-371), was die Erkennung von volllängigem STING sowie potenziellen Isoformen wie STING-beta sicherstellt. Überprüfen Sie die Spezifität an Knockout-Proben oder durch Peptid-Blockierung.
• Für das Western Blotting sollte ein erwarteter Band nahe 43 kDa beobachtet werden. Beachten Sie, dass posttranslationale Modifikationen und alternatives Spleißen zusätzliche Bänder erzeugen können.
• IHC-P-Anwendungen: Die optimalen Bedingungen für die Antigen-Retrieval (wärmeinduzierte Epitop-Retrieval mit Citratpuffer, pH 6,0, oder EDTA-Puffer, pH 9,0) sollten empirisch ermittelt werden. Positive Kontrollgewebe umfassen Mausmilzmilz oder Thymus; berücksichtigen Sie nukleäre/perinukleäre und zytoplasmische Färbemuster.
• Für ELISA kann die Paarung mit einem Fangantikörper gegen ein anderes Epitop (z. B. N-terminal) für Sandwich-Assays vorteilhaft sein. Validieren Sie den Arbeitskonzentrationsbereich unter Verwendung von rekombinantem Maus-STING-Protein.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit humanem und rattem STING; bestätigen Sie jedoch die Sequenzhomologie im Immunogenbereich und validieren Sie im entsprechenden Probenystem.

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