Anti-ST8SIA1 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q92185

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ST8SIA1-Funktion und Lokalisierung

• ST8SIA1 (Alpha-N-Acetylneuraminid Alpha-2,8-Sialyltransferase), auch bekannt als GD3-Synthase, ist eine Glykosyltransferase, die Sialinsäure in Alpha-2,8-Bindung an GM3 anfügt, um das Gangliosid GD3 zu bilden, ein Schlüsselschritt in der Gangliosid-Biosynthese (PubMed:18348864, PubMed:22885356, PubMed:7937974). Verwandte Referenzen: PMID:18348864 PMID:22885356 PMID:7937974
• Es kann GD3 weiter zu GT3 verlängern und verwendet Substrate wie GM1b, GD1a und GT1b, um komplexe Ganglioside GD1c, GT1a und GQ1b zu synthetisieren (PubMed:8631981, PubMed:8706663). Verwandte Referenzen: PMID:8631981 PMID:8706663
• Das Protein ist mit einer Typ-II-Topologie in der Golgi-Apparat-Membran verankert, charakteristisch für Sialyltransferasen, und besitzt eine Signalanker-Sequenz und eine Transmembran-Helix.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen; die kanonische Isoform hat ein Molekulargewicht von etwa 40,5 kDa (UniProt: 40519 Da), während das beobachtete immunogenbasierte Gewicht 41 kDa beträgt.
• ST8SIA1 ist stark in Melanom-Zelllinien, adultem und fetalem Gehirn exprimiert und in geringerem Maße in adulten und fetalen Lungen, was mit seiner Rolle in neuronalen und krebsassoziierten Gangliosidmustern übereinstimmt.
• Es enthält Disulfidbindungen und N-gebundene Glykosylierungsstellen, die für die korrekte Faltung und enzymatische Aktivität im Golgi entscheidend sind.
• In Brustkrebszellen kann es ungewöhnliche tetra- und pentasialylierte Lactosylceramid-Derivate GQ3 und GP3 synthetisieren, was seine Rolle in der krebsassoziierten Glykosylierung unterstreicht (PubMed:22885356). Verwandte Referenzen: PMID:22885356

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 49–270, eine Region, die wahrscheinlich die Transmembrandomäne nicht enthält, was auf eine Antikörpererkennung der löslichen katalytischen Domäne hindeutet. Für WB verwenden Sie reduzierende denaturierende Bedingungen und eine positive Kontrolle (z. B. Melanomzelllysat), um Banden nahe 41 kDa zu bestätigen.
• Aufgrund der polyklonalen Natur können mehrere Isoformen oder posttranslationale Modifikationen erkannt werden. Erwägen Sie die Behandlung von Proben mit PNGase F, um glykosylierungsabhängige Verschiebungen zu beurteilen.
• Kreuzreaktivität mit Maus-ST8SIA1 ist angegeben, was Studien in Mausmodellen ermöglicht. Validieren Sie die speziesspezifische Reaktivität im relevanten Probensystem vor groß angelegten Experimenten.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; titrieren Sie ihn optimal gegen rekombinantes ST8SIA1 oder zellderivierte Gangliosidextrakte.

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