Monoklonaler Anti-SRSF3-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P84103

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von SRSF3

• SRSF3 (auch bekannt als SFRS3 oder SRp20) ist ein Mitglied der Familie der Serin/Arginin-reichen (SR-)Proteine, die als prä-mRNA-Spleißfaktoren fungieren.
• Es bindet spezifisch an das Konsensusmotiv 5'-C[ACU][AU]C[ACU][AC]C-3' innerhalb der prä-mRNA, um während des alternativen Spleißens den Einschluss von Ziel-Exons zu fördern. Zugehörige Referenzen: PMID:17036044, PMID:26876937, PMID:32440474
• Die Interaktion mit YTHDC1, einem m6A-Reader, rekrutiert SRSF3 in mRNA-Regionen neben m6A-Stellen und verknüpft dadurch die m6A-Modifikation mit der Regulation des Spleißens. Zugehörige Referenzen: PMID:26876937
• SRSF3 fungiert außerdem als Adapter für den nukleären Export; es bindet an reife mRNA und erleichtert deren Übertragung auf den NXF1-NXT1-Exportrezeptor (TAP/NXF1), wodurch der nukleäre mRNA-Export verstärkt wird. Zugehörige Referenzen: PMID:11336712, PMID:18364396
• Über YTHDC1 ist SRSF3 am selektiven nukleären Export von m6A-modifizierten mRNAs beteiligt. Zugehörige Referenzen: PMID:28984244
• Es befindet sich überwiegend im Zellkern und in nukleären Speckles, kann jedoch im Zusammenhang mit dem mRNA-Transport auch im Zytoplasma vorkommen.
• SRSF3 durchläuft mehrere posttranslationale Modifikationen, darunter Phosphorylierung und Acetylierung, die seine Aktivität und Interaktionen regulieren.
• Das Protein enthält RNA-Erkennungsmotive (RRMs) sowie eine charakteristische Arginin/Serin-reiche (RS-)Domäne, die für SR-Proteine typisch ist.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das zur Herstellung dieses rekombinanten monoklonalen Antikörpers verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1–100 des menschlichen SRSF3 umfasst. Diese N-terminale Region ist konserviert und kann es dem Antikörper ermöglichen, mehrere Isoformen zu erkennen; eine Validierung im Kontext der jeweiligen Zielprobe wird jedoch empfohlen.
• Beim Western Blot (WB) liegt die erwartete Bande für SRSF3 bei etwa 19 kDa. Verwenden Sie geeignete positive und negative Kontrollen und erwägen Sie die Prüfung verschiedener Bedingungen für Lysatvorbereitung und Probenauftragung, um das Signal zu optimieren.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) wird die Färbung von SRSF3 hauptsächlich im Zellkern erwartet, wobei aufgrund seiner Rolle beim mRNA-Export möglicherweise auch ein zytoplasmatisches Signal auftreten kann. Validieren Sie den Antikörper in Geweben, von denen bekannt ist, dass sie SRSF3 exprimieren, und schließen Sie Isotypkontrollen ein.
• Für ELISA-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper und verwenden Sie einen geeigneten Antigenstandard, um Sensitivität und Spezifität zu bestimmen; die Bedingungen sollten für jedes Assayformat empirisch ermittelt werden.

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