Anti-SREBF2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q12772

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SREBF2-Funktion und -Lokalisierung

• SREBF2 (Sterol Regulatory Element Binding Transcription Factor 2) ist ein „basic helix-loop-helix leucine zipper“ (bHLH-LZ) Transkriptionsfaktor, der für die Lipidhomöostase kritisch ist.
• Er fungiert als Master-Transkriptionsfaktor für die Cholesterinbiosynthese und -aufnahme und reguliert Gene wie die HMG-CoA-Reduktase und den LDL-Rezeptor.
• SREBF2 wird als inaktives Vorläuferprotein synthetisiert, das in der Membran des endoplasmatischen Retikulums (ER) verankert ist. Verwandte Referenzen: PMID:32322062
• Bei niedrigen Cholesterinspiegeln wird das Vorläuferprotein in den Golgi-Apparat transportiert und proteolytisch verarbeitet, um die aktive N-terminale Domäne freizusetzen, die in den Zellkern transloziert, um die Expression der Zielgene zu aktivieren. Verwandte Referenzen: PMID:32322062
• Es bindet mit hoher Affinität an das Sterol Regulatory Element 1 (SRE-1; 5′-ATCACCCCAC-3′) und erkennt auch E-Box-Motive (5′-ATCACGTGA-3′), was die Regulation verschiedener Promotoren ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:12177166 PMID:7903453
• SREBF2 ist in adulten und fetalen menschlichen Geweben ubiquitär exprimiert, was seine fundamentale Rolle im zellulären Cholesterinstoffwechsel widerspiegelt.
• Das Protein wandert zwischen ER, Golgi-Apparat, COPII-Vesikeln und Zellkern, wobei die subzelluläre Verteilung eng durch den zellulären Sterolstatus gesteuert wird.
• Posttranslationale Modifikationen einschließlich Phosphorylierung, Ubiquitinierung und Isopeptidbindungsbildung modulieren seine Stabilität und Aktivität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 401–500 innerhalb der N-terminalen Transkriptionsfaktordomäne; sowohl das全长-Vorläuferprotein (~124 kDa) als auch die gespaltene Kernform (~68 kDa) können je nach Zellbehandlungsbedingungen im Western Blot nachgewiesen werden.
• Für Western Blots sollten Sie die Verwendung von Proteaseinhibitoren in Betracht ziehen und eine Steroldepletion (z. B. mit Statinen) durchführen, um die aktive Kernform anzureichern.
• In Immunfluoreszenzexperimenten kann die Permeabilisierung und Färbung von Zellen, die unter sterolarmen Bedingungen kultiviert wurden, die Kernsignallokalisierung verbessern.
• Eine Kreuzreaktivität mit mausigem SREBF2 wurde berichtet; validieren Sie jedoch den Antikörper in Ihrem spezifischen Mausgewebe oder Ihrer Zelllinie, da die Expressionsniveaus variieren können.
• Der Antikörper ist für ELISA-Anwendungen geeignet; titrieren Sie ihn für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis und fügen Sie geeignete Kontrollen hinzu.

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