Anti-SREBF1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P36956

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SREBF1-Funktion und -Lokalisierung

• SREBF1 (auch bekannt als SREBP1, bHLHd1) kodiert einen sterolregulatorischen Element-bindenden Transkriptionsfaktor, der als Vorläufer in der Membran des endoplasmatischen Retikulums (ER) vorliegt. Bei niedrigen Sterolkonzentrationen wird er verarbeitet, um die Transkriptionsfaktorform freizusetzen, die in den Zellkern transloziert. Verwandte Referenzen: PMID:32322062
• Gespaltenes SREBF1 bindet an das sterolregulatorische Element 1 (SRE-1; 5'-ATCACCCCAC-3') und E-Box-Motive (5'-ATCACGTGA-3') in den Promotoren von Genen, die an der Cholesterinbiosynthese und dem LDL-Rezeptor-Weg beteiligt sind, und aktiviert dadurch deren Transkription. Verwandte Referenzen: PMID:12177166, PMID:32322062, PMID:8402897
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen mit unterschiedlichen Aktivitäten: Die Isoform SREBP-1A (exprimiert in ausgewählten Geweben) besitzt eine hohe transkriptionelle Aktivität und stimuliert sowohl die Expression von lipogenen als auch cholesterogenen Genen, wohingegen die vorherrschende Isoform SREBP-1C (exprimiert in Leber, Fettgewebe und anderen Geweben) primär lipogene Gene reguliert und eine schwächere Aktivität aufweist. Verwandte Referenzen: PMID:12177166, PMID:32497488
• Darüber hinaus ist eine Isoform, die keine Golgi-Proteolyse-Verarbeitung erfordert, konstitutiv bei der Aktivierung von Promotoren lipogener Gene aktiv.
• Subzellulär zirkuliert SREBF1 zwischen den Membranen des endoplasmatischen Retikulums und des Golgi-Apparats; nach Aktivierung wird das Transkriptionsfaktor-Fragment freigesetzt und in den Zellkern transloziert. Es ist auch in COPII-beschichteten Vesikeln zu finden.
• SREBF1 ist ein Phosphoprotein und unterliegt der Ubiquitinierung, was im Einklang mit regulierten membranassoziierten Transkriptionsfaktoren steht.
• Das Protein ist weit verbreitet exprimiert, mit höchsten Spiegeln in Leber und Nebenniere; in fetalen Geweben zeigen Lunge und Leber eine Spitzenexpression. Verwandte Referenzen: PMID:8402897
• SREBF1 spielt eine kritische Rolle im Lipidstoffwechsel und wurde mit Krankheitsvarianten wie Ichthyose in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das rekombinante Immunogen (Aminosäuren 200–310 von humanem SREBF1) entspricht einer konservierten Region, was darauf hindeutet, dass der Antikörper mehrere Isoformen erkennen kann und potenziell wie aufgeführt mit Maus und Ratte kreuzreagiert.
• Bei Western-Blot-Experimenten ist ein Band bei ca. 122 kDa zu erwarten, das dem全长-Vorläufer entspricht; je nach Sterolstatus der Zelle kann auch ein kleineres Band (~68 kDa) beobachtet werden, das den gespaltenen aktiven Transkriptionsfaktor darstellt.
• Für die Immunfluoreszenz kann die Lokalisierung unter sterolreichen Bedingungen zytoplasmische/endoplasmatische Retikulum-Muster umfassen und bei Sterolentzug zu einer Kerntranslozierung führen; eine Co-Färbung mit Organellmarkern wird empfohlen.
• Optimale Verdünnungen für WB, IF/ICC und ELISA sollten empirisch unter Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollen bestimmt werden.

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