Anti-SQS/FDFT1 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, ELISA - P37268

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SQS/FDFT1-Funktion und -Lokalisierung

• Squalensynthase (SQS), codiert durch das FDFT1-Gen, ist ein bifunktionelles Enzym, das den ersten committed Schritt der Sterolbiosynthese katalysiert und aus zwei Farnesylpyrophosphat-Molekülen (FPP) Squalen produziert.
• Die Reaktion verläuft in zwei verschiedenen Halbreaktionen: Zunächst wird aus zwei FPP Presqualendiphosphat (PSQPP) gebildet, gefolgt von Heterolyse, Isomerisierung und einer NADPH/NADH-abhängigen Reduktion zu Squalen.
• Als erstes Enzym im Cholesterinbiosyntheseweg spielt SQS eine entscheidende Rolle bei der Regulierung der intrazellulären Cholesterinspiegel und ist ein wichtiger Kontrollpunkt der Sterolhomöostase.
• Alternatives Spleißen von FDFT1 erzeugt mehrere Isoformen; die kanonische Isoform lokalisiert über eine C-terminale Transmembranhelix an die Membran des endoplasmatischen Retikulums.
• SQS ist in menschlichen Geweben weit verbreitet; ihre Aktivität ist besonders in Leber, Darm und steroidogenen Organen von Bedeutung, wo eine hohe Cholesterinsyntheserate stattfindet.
• Posttranslationale Modifikationen und strukturelle Merkmale umfassen magnesiumabhängige Aktivität, NAD(P)-Kofaktorbindung und einen Katalysemechanismus, der mehrere Metallbindungsstellen beinhaltet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem internen Peptid (aa 150-250) von menschlichem SQS/FDFT1, was darauf hindeutet, dass der Antikörper Epitope erkennen könnte, die über Arten hinweg konserviert sind; bestätigen Sie die Spezifität im entsprechenden experimentellen Modell.
• Für Western Blotting beträgt das erwartete Molekulargewicht ca. 48 kDa; erwägen Sie die Verwendung geeigneter positiver Kontrollen (z. B. Leber- oder HeLa-Zelllysate) und validieren Sie die Bandenidentität mit Knockdown- oder Knockout-Proben.
• Bei ELISA-Anwendungen wird eine Optimierung der Antikörperkonzentration und der Blockierungsbedingungen empfohlen, um den Hintergrund zu minimieren; die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-SQS kann translationsorientierte Studien erleichtern, sollte aber unabhängig überprüft werden.
• Reduzierende und nicht-reduzierende SDS-PAGE können die Detektion beeinflussen; standardisieren Sie die Gelbedingungen und Membrantransferprotokolle für konsistente Ergebnisse.

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