Anti-SPINK5/LEKTI Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – Q9NQ38

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SPINK5/LEKTI (Serinproteaseinhibitor Kazal-Typ 5)

• SPINK5 (Serinpeptidaseinhibitor Kazal-Typ 5) kodiert für den Serinproteaseinhibitor LEKTI (Lympho-Epithelial Kazal-Type-related Inhibitor), ein sezerniertes Multidomänenprotein aus der Familie der Kazal-Typ-Serinproteaseinhibitoren. Es enthält mehrere Kazal-Domänen und Disulfidbindungen mit einem Molekulargewicht von etwa 121 kDa.
• LEKTI fungiert als zentraler Regulator der Proteaseaktivität in Haut und Schleimhautepithelien und hemmt Kallikreine (KLK5, KLK7, KLK14), Caspase-14 (CASP14) und Trypsin in Abhängigkeit vom pH-Wert. Diese Hemmung ist entscheidend für die Erhaltung der schützenden Barriere der Haut sowie die Kontrolle von Desquamation und Entzündung.
• Das Protein wird stark in Thymus und der Hornschicht der Haut exprimiert; weitere Nachweise gibt es in der Mundschleimhaut, Nebenschilddrüse, Bartholin-Drüsen, Mandeln und Vaginalepithel. In Lunge, Niere und Prostata kommt es nur in sehr geringen Mengen vor.
• LEKTI ist ein sezerniertes Protein, das proteolytisch prozessiert wird – einschließlich der Spaltung an gepaarten basischen Resten – wodurch mehrere aktive Fragmente entstehen. Durch alternatives Spleißen entstehen unterschiedliche Isoformen.
• Aufgrund seiner Rolle bei der Hemmung proentzündlicher und prodesquamatorischer Proteasen trägt LEKTI zur antimikrobiellen Abwehr bei und verhindert übermäßigen Gewebeabbau; Mutationen in SPINK5 sind mit dem Netherton-Syndrom verbunden, das durch schwere Hautbarrieredefekte charakterisiert ist.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 100–200 von humanem SPINK5/LEKTI (Q9NQ38) entspricht und im N-terminalen Bereich lokalisiert ist. Für den Western Blot (WB) empfehlen sich Ganzzelllysate aus Geweben mit hoher LEKTI-Expression (z. B. Haut, Thymus) oder rekombinante Proteinkontrollen zur Validierung der Antikörperspezifität. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 121 kDa, aber auch prozessierte Fragmente können nachgewiesen werden.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser monoklonale Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz zur Quantifizierung von LEKTI-Spiegeln in biologischen Flüssigkeiten oder Gewebeextrakten verwendet werden. Stellen Sie eine optimale Anpassung der Beschichtungskonzentrationen und Blockierungsbedingungen sicher.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf eine Konservierung des Epitops hin, dennoch wird eine Sequenzausrichtung der Immunogenregion zwischen den Arten empfohlen, um die potenzielle Bindung zu bestätigen. Validieren Sie den Antikörper in dem für Ihren Versuchsaufbau relevanten Probensystem.
• Angesichts der pH-abhängigen Aktivität von LEKTI sollten Sie den Einfluss des pH-Werts auf die Antikörper-Antigen-Bindung berücksichtigen, wenn Sie Assays unter unterschiedlichen Pufferbedingungen entwickeln.

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