Anti-SPHK2 Polyclonales Antikörper für WB, ELISA - Q9NRA0

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von SPHK2

• Katalysiert die Phosphorylierung von Sphingosin zu Sphingosin-1-Phosphat (SPP), einem Lipidmediator mit intra- und extrazellulären Funktionen; wirkt außerdem auf andere Sphingoidbasen und bindet Phosphoinositide. Verwandte Referenzen: PMID:12954646, PMID:19168031
• Im Gegensatz zum überlebensfördernden SPHK1 reguliert SPHK2 die intrazellulären Ceramidspiegel positiv, hemmt das Zellwachstum und verstärkt die Apoptose. Verwandte Referenzen: PMID:16118219
• In Mitochondrien bindet das von SPHK2 produzierte SPP an PHB2, um die Cytochrom-C-Oxidase-Assemblierung und die mitochondriale Atmung zu modulieren. Verwandte Referenzen: PMID:20959514
• Im Zellkern interagiert SPHK2 mit HDAC1/HDAC2, hemmt deren Deacetylase-Aktivität über SPP, was zu einer erhöhten Acetylierung der Histone H3-K9, H4-K5 und H2B-K12 führt und dadurch die epigenetische Genexpression reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:19729656
• Der nukleare SPHK2 kann auch die DNA-Synthese und den Zellzyklusablauf hemmen. Verwandte Referenzen: PMID:12954646, PMID:16103110
• Lokalisiert in mehreren zellulären Kompartimenten, darunter Zytoplasma, Zellkern, Endoplasmatisches Retikulum, mitochondriale Innenmembran und Lysosomenmembran.
• Wird überwiegend in Niere, Leber und Gehirn exprimiert, wobei Isoform 1 die Hauptform in den meisten Geweben ist; auf Proteinebene wird sie in der Großhirnrinde und im Hippocampus nachgewiesen. Verwandte Referenzen: PMID:10751414, PMID:29615132, PMID:16103110
• Wird als ATP-bindende Kinase klassifiziert, die am Lipidstoffwechsel beteiligt ist; weist alternatives Spleißen und Phosphorylierungsmodifikationen auf.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die N-terminale Region (Aa 1-165) des humanen SPHK2 ab, eine Domäne, die über alle Isoformen konserviert ist; das Antikörper kann mehrere Spleißvarianten erkennen.
• Für Western Blot (WB) empfehlen wir die Verwendung von Lysaten aus Zelllinien oder Geweben, die bekanntermaßen SPHK2 exprimieren, wie HEK293, HeLa oder Niere-/Leber-/Gehirnproben, mit geeigneten Beladungskontrollen.
• Optimieren Sie im ELISA die Konzentration des beschichteten Antikörpers und die Pufferbedingungen entsprechend Ihrem Plattenformat und Detektionssystem; fügen Sie eine Standardkurve zur Quantifizierung hinzu.
• Da SPHK2 an Membranen bindet, fügen Sie milde Detergenzien zu Lysepuffern hinzu, um eine effiziente Extraktion und Detektion zu gewährleisten.

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