Anti-SPHK1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q9NYA1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Sphingosin-Kinase 1

• SPHK1 katalysiert die Phosphorylierung von Sphingosin zur Bildung von Sphingosin-1-phosphat (S1P), einem Lipidmediator mit intra- und extrazellulären Funktionen. Es wirkt auch auf D-Erythro-Sphingosin und in geringerem Maße auf Sphinganin, jedoch nicht auf andere Lipide wie Diacylglycerol, Ceramid oder Phosphatidylinositol. Verwandte Referenzen: PMID:11923095 PMID:20577214 PMID:23602659
• Im Gegensatz zu pro-apoptotischem SPHK2 hat SPHK1 einen negativen Effekt auf die intrazellulären Ceramidspiegel, fördert das Zellwachstum und hemmt die Apoptose. Verwandte Referenzen: PMID:16118219
• Über sein Produkt S1P stimuliert SPHK1 die E3-Ubiquitin-Ligase-Aktivität von TRAF2 und fördert die Aktivierung von NF-kappa-B als Reaktion auf TNF-Signalgebung, was zur IL17-Sekretion führt. Verwandte Referenzen: PMID:20577214
• Als Reaktion auf TNF reguliert SPHK1 die RANTES-Induktion über den p38-MAPK-Signalweg negativ. Verwandte Referenzen: PMID:23935096
• SPHK1 ist am endozytischen Membrantransport beteiligt, wird zu erweiterten Endosomen rekrutiert und spielt eine Rolle in späteren Stadien der Endosomenreifung und Membranfusion unabhängig von seiner Kinaseaktivität. Verwandte Referenzen: PMID:24929359 PMID:28049734
• In Purkinje-Zellen ist SPHK1 an der Regulation der Autophagosom-Lysosomen-Fusion nach VEGFA beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:25417698
• SPHK1 zeigt auch Serin-Acetyltransferase-Aktivität gegenüber PTGS2/COX2 auf Acetyl-CoA-abhängige Weise und moduliert die Neuroentzündung durch Förderung der neuronalen Sekretion von spezialisierten pro-resolvierenden Mediatoren.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zellkern, Zellmembran, Endosomenmembran, Clathrin-bedeckte Gruben und Synapse.
• Weit verbreitet exprimiert, mit höchsten Spiegeln in Leber, Niere, Herz und Skelettmuskel von Erwachsenen; auch exprimiert in der Großhirnrinde. Verwandte Referenzen: PMID:29662056

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 50-384 von menschlichem SPHK1 umfasst und die katalytische Domäne enthält. Für Western Blot sollte ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ca. 43 kDa berücksichtigt werden. Validieren Sie die Antikörperspezifität mit geeigneten menschlichen oder Maus-Gewebelysaten, da für beide Arten eine Kreuzreaktivität berichtet wird.
• Optimieren Sie für ELISA die Antikörper-Beschichtungskonzentration und die Assay-Bedingungen. Erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem SPHK1-Protein als Positivkontrolle.
• Da SPHK1 an mehreren Signalwegen beteiligt ist, überprüfen Sie den Nachweis unter relevanten Stimulationsbedingungen (z. B. TNF-Behandlung), um den funktionellen Kontext zu bewerten.

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